论文摘要
目的制备一种药物羊膜材料,即负载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒的胶联羊膜,初步研究该材料的体外释药性能。方法本研究分四个步骤:一:离子交联法制备载表皮生长因子的壳聚糖纳米粒（rhEGF/CS nanoparticles）,并考察其粒径,表面电位,多分散性和包封率等特征。二:与未被包封的表皮生长因子相比较,考察壳聚糖纳米粒包封的表皮生长因子在兔眼结膜匀浆中的稳定性。三:将载药壳聚糖纳米粒加入到纤维蛋白胶试剂盒中的凝血酶溶液中,再将此溶液与在羊膜表面覆盖的纤维蛋白原溶液混合及反应,制备出载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒胶联羊膜（rhEGF/CS-FBAM）。分别与rhEGF/CS纳米粒和载单纯表皮生长因子的胶联羊膜（rhEGF-FBAM）比较,考察rhEGF/CS-FBAM释放表皮生长因子的性能。四:从rhEGF/CS-FBAM中释放的表皮生长因子加入到细胞培养基中,用MTT法考察其对体外培养的小鼠成纤维细胞（BALB/c 3T3）的增殖作用,以加入单纯表皮生长因子的细胞培养基为阳性对照组,不加表皮生长因子的细胞培养基为阴性对照组。结果一:制备的载表皮生长因子的壳聚糖纳米粒粒径分布在264.0±4.2～288.6±2.8 nm,表面电位分布在31.3±0.5～43.7±0.8 mV,多分散性分布在0.19±0.02～0.26±0.02,包封率（%）分布在54.87±2.94～67.03±1.22。二:在兔眼结膜匀浆中孵育1 h,2 h,3 h,4 h,5 h,6 h后,壳聚糖纳米粒包封的表皮生长因子在各个时间点上的回收率均高于未被包封的表皮生长因子（P< 0.05）。三:rhEGF/CS纳米粒能持续释放表皮生长因子约72 h,初始阶段有明显的突释现象。rhEGF-FBAM能持续释放表皮生长因子约96 h,未见明显的突释。相比前两者,rhEGF/CS-FBAM释放表皮生长因子更为稳定和缓慢,可持续14 d,且其释药速率可随制备rhEGF/CS-FBAM时纤维蛋白原或凝血酶的浓度增加而下降。四:在各个时间点上,实验组光密度值（OD）高于阴性对照组（P< 0.05）,与阳性对照组比较无差别（P> 0.05）。结论本研究设计制备的药物羊膜材料结合了壳聚糖纳米粒,纤维蛋白胶和羊膜三者的优点,具有以下性能:1、壳聚糖纳米粒可保护表皮生长因子,提高其生物稳定性2、纤维蛋白胶可作为药物储存库,可长时间缓释控释表皮生长因子3、羊膜可作为移植材料,为伤口的修复提供基底膜。相比于单纯羊膜和胶联羊膜,rhEGF/CS-FBAM在移植的同时,可有效释放治疗性生长因子,更好的促进伤口愈合。该复合羊膜材料的临床效果有待进一步证实。