论文摘要
煤污病和蝇粪病是附生在植物表面的常见病害,在世界各地均有发生。在各种果实表面和多种乔木,灌木茎叶上时有发生。它在寄主植物表面形成污斑或污点,使果实品质降低、价格下降、观赏价值降低等。本试验将分子系统学技术与传统真菌分类学相结合,对煤污病和蝇粪病进行了研究。2008和2009年在果实生长后期对中国陕西、四川、贵州和重庆四个省市的17个地区,采集到煤污病和蝇粪病样品500余份。分离了苹果煤污病和蝇粪病样品的400份标本,得到纯菌种234株;选出44株代表性的菌株进行核糖体基因rDNA内部转录间隔区(ITS)区域序列的测定,构建系统发育树。结果表明,苹果上分离到的病原可以划分到锥梗孢属Dissoconium,枝氯霉属Ramichloridium,月盾霉属Peltaster,异形霉属Xenostigmina,接瓶霉属Zygophiala,假小尾孢属Pseudocercosporella,球腔菌属Mycosphaerella,短梗霉属Aureobasidium,Stomiopeltis,Septoria等十个属中,在此基础上,结合形态分析和各属内ITS序列比较,对苹果煤污病和蝇粪病菌株进行了系统鉴定,发现5个新种和1个国内新纪录种:分别为山龙眼锥梗孢Dissoconium proteae;苹果异形霉Xenotigmina mali;掌形假小尾孢Pseudocercosporella plamarosa;白水月盾霉Peltaster baishuiensis和永寿月盾霉Peltaster yongshouensis。这充分说明了煤污病和蝇粪病病原具有广泛的多样性。对柑橘,李子,梨等常见水果上的煤污病和蝇粪病进行了分离,得到柑橘煤污病和蝇粪病标本80份,获得到纯菌株70株;分离梨煤污病和蝇粪病标本32份,得到17株纯菌株;保存并分离李子煤污病和蝇粪病标本8份,得到8个纯菌株;保存并分离竹子煤污病和蝇粪病标本9份,得到纯菌株5株。选取各种寄主上代表性菌株进行测序分析,得到柑橘煤污病和蝇粪病菌株的27个ITS序列,梨煤污病和蝇粪病菌株的9个ITS序列,及李子煤污病和蝇粪病菌株的6个ITS序列和竹子煤污病和蝇粪病菌株的1个ITS序列。结果表明:柑橘煤污病和蝇粪病可以划分到六个属Strelitziana、Phialophora、Dissoconium、Ramichloridium、Stenella、Septoria。梨煤污病和蝇粪病可以归为Zygophiala、Peltaster、Stomiopeltis、Septoria等4个属,Ramichloridium apiculatum和Zasmidium prunus这两个种可以引起李子煤污病。以传统真菌分类学为依托(病原菌形态学特征和菌落培养性状),结合ITS序列分析对储存寄主煤污病和蝇粪病菌株进行了系统鉴定,发现柑橘煤污病和蝇粪病病原横断孢属的1个新种,柑橘横断孢Strelitziana citri和一个暂定名种Strelitziana sp. 1;李子煤污病和蝇粪病的一个新种Zasmidium prunus。根据对ITS系统发育树的分析,结合以上各属在PDA培养基上的菌落性状,对试验分离得到334个纯菌株初步分类,发现其中有305个菌株可以归于上述的14个属中,余下29个菌株不能明确归属。对储存寄主柑橘、梨、李子、竹子煤污病和蝇粪病病原菌的组成进行的研究表明,煤污病和蝇粪病病原菌在储存寄主间可以相互侵染,本论文初步揭示了常见水果柑橘、李子和梨煤污病和蝇粪病病原菌具有多样性,同时显示出煤污病和蝇粪病寄主的广泛性。
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