论文摘要
目的:本研究旨在探讨酒精与CCl4对肝纤维化形成是否有协同作用,水飞蓟素对CCl4和/或酒精（酒精+CCl4）所致小鼠肝纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法:90只昆明小鼠随机分为9组,每组10只,A组:空白对照组（小鼠+生理盐水灌胃）,B组:CCl4+酒精模型组（小鼠+CCl4皮下注射+10%酒精代水饮+生理盐水灌胃）;C组:低剂量药物治疗组（小鼠+CCl4皮下注射+10%酒精代水饮+低剂量水飞蓟素灌胃）;D组:中剂量药物治疗组（小鼠+CCl4皮下注射+10%酒精代水饮+中剂量水飞蓟素灌胃）;E高剂量药物治疗组（小鼠+CCl4皮下注射+10%酒精代水饮+高剂量水飞蓟素灌胃）;F组:CCl4模型组（小鼠+CCl4皮下注射+生理盐水灌胃）;G组:CCl4模型+药物治疗组（小鼠+CCl4皮下注射+中剂量水飞蓟素灌胃）;H组:酒精模型组（小鼠+10%酒精代水饮+生理盐水灌胃）;Ⅰ组:酒精模型+药物治疗组（小鼠+10%酒精代水饮+中剂量水飞蓟素）;于第8周末处死小鼠,收集血液进行肝功能检查,组织病理切片,HE染色后观察肝脏损伤程度,Masson染色观察肝纤维化程度,采用HAI评分方法判断各组肝损伤程度,半定量RT-PCR观察分析各组小鼠肝脏组织TGF-β1、a-SMA及Col-I的表达。结果:（1）成功建立肝纤维化模型,表现在单纯CCl4模型组较空白对照组AST、ALT明显升高（P＜0.05）,病理学检查可见肝细胞变性和坏死程度比较严重,并出现肝纤维组织增生,RT-PCR结果显示肝组织TGF-β1、a-SMA及Col-ImRNA表达水平明显增高;单纯酒精模型组较空白对照组AST、ALT升高（P＜0.05）,但组织形态学变化不明显,而TGF-β1、a-SMA及Col-ImRNA表达水平升高（P＜0.05）;CCl4+酒精组较空白对照组、单纯CCl4或酒精各组AST、ALT都明显升高（P＜0.05）、病理学检查可见肝细胞变性和坏死程度更严重,并出现严重肝纤维组织增生,RT-PCR结果显示TGF-β1、a-SMA及Col-ImRNA表达水平明显升高。（2）经水飞蓟素处理后使各相应模型组（CCl4+酒精或单纯CCl4）AST、ALT明显下降（P＜0.05）;病理学检查可见肝细胞变性和坏死程度较相应模型组减轻;RT-PCR结果显示水飞蓟素减少了TGF-β1、a-SMA及Col-I在肝脏组织的表达,且以100mg/kg体重水飞蓟素效果最好。结论:（1）单纯饮用小剂量酒精对小鼠肝功能有影响,对肝纤维化影响不明显,但酒精可加重CCl4对肝脏纤维化损伤;并初步发现肝纤维化与肝组织TGF-β1、a-SMA及Col-I基因表达增加有关。（2）水飞蓟素可减轻CCl4和/或酒精对肝脏的损害和肝纤维化程度,其保护作用可能与减少了肝脏组织TGF-β1、a-SMA及Col-I的基因表达有关。