外源性胰岛素对2型糖尿病大鼠肾保护作用及肾组织NF-κB、MCP-1表达的影响

论文摘要

目的观察外源性胰岛素对2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM）大鼠血核因子-κB（nuclear factor-κB, NF-κB）、MCP-1（monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1）的水平、尿MCP-1的排泄和肾组织NF-κB、MCP-1的表达及对肾脏结构、功能的影响,探讨外源性胰岛素对T2DM大鼠的肾脏保护作用及机制。方法40只健康清洁级SD雄性大鼠,随机选10只作为正常对照组（A组）喂饲常规饲料,其余30只喂饲高糖高脂膳食、腹腔注射小剂量链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）的方法建立T2DM大鼠模型,将成模的T2DM大鼠随机分为糖尿病组（B组）、优降糖治疗组（C组）、外源性胰岛素治疗组（D组）三个组,继续予以高糖高脂饲料喂养,其中C组每天以优降糖（5mg/kg）灌胃给药,A组、B组和D组灌以等量的生理盐水,D组予长效胰岛素皮下注射（2-8U/kg）,根据血糖调整用量。药物干预第8周后收集12小时尿,并处死大鼠,收集血检测血MCP-1（serum monocyte chemoattractant protein-1, sMCP-1）、NF-κB、糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin A1c, HbA1c）、空腹血糖（fasting peripheral blood glucose,FBG）及血浆胰岛素（fasting insulin,FINS）、甘油三酯（triglyceride,TG）、胆固醇（cholesterol,TC）、UMCP-1的排泄率、尿白蛋白/肌酐（urinary albumin/creatinine ratio, ACR）和尿视黄醇结合蛋白（urinary retinol binding-protein, URBP）,留取肾脏标本计算肾脏肥大指数,应用免疫组化法检测肾组织中MCP-1、NF-κB表达水平,同时在光镜和电镜下进行病理学检查,观察肾脏组织结构变化。结果1.药物干预第8周后,B组、C组和D组的FBG和HbA1c水平显著高于A组（P<0.05）,C组和D组的FBG和HbA1c水平较B组下降（P<0.05）,但C组和D组两组间差异无统计学意义（P>0.05）;B组、C组和D组的TC、TG水平均显著高于A组（P<0.05）,但B组、C组和D组之间相比差异无统计学意义（P>0.05）。2.药物干预第8周后,与A组相比,B组、C组和D组大鼠ACR、URBP水平、血NF-κB、sMCP-1的浓度水平、UMCP-1排泄率水平均显著升高（P<0.05）;与A组相比,B组和C组的肾脏肥大指数明显升高（P<0.05）;与B组和C组相比,D组上述各项指标均明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）;与B组相比,C组上述指标均有下降,但差异无统计学意义（P>0.05）。血NF-κB、sMCP-1、UMCP-1排泄率分别与FBG、HbA1c、ACR、URBP排泄率及肾脏肥大指数呈正相关（P<0.01）。3.药物干预第8周后,在光学显微镜下,A组肾组织形态无明显改变;B组则形态学改变较明显,肾小球体积增大,肾小球毛细血管袢塌陷,管腔闭塞,基底膜增厚和系膜基质增生,肾间质可见大量炎性细胞浸润;C组与B组相比病理改变稍有改善,但肾小球体积较大,系膜基质增生、基底膜增厚;D组肾组织病变较B组及C组明显减轻。4.药物干预第8周后,在透视电子显微镜下可见A组超微结构清晰;B组肾小球基底膜（glomerular basement membrane, GBM）明显增厚、结构模糊,足突（foot processes, FP）广泛增粗、融合、断裂,系膜区基质增多,系膜细胞增生;C组与B组相比稍有好转,GBM增厚,FP破坏、融合;D组的GBM较B组及C组明显变薄,GBM的微结构相对规则,有少量FP融合。5.药物干预第8周后,肾组织免疫组化结果显示B组、C组和D组大鼠肾小球和肾小管MCP-1、NF-κB表达均较A组显著增强（P<0.05）;C组与B组相比肾组织着色减轻及NF-κB和MCP-1表达水平下降,但差异无统计学意义（P>0.05）;而D组MCP-1、NF-κB表达较B组及C组有明显减弱（P<0.05）。结论1.外源性胰岛素可以降低T2DM大鼠血糖及尿ACR、URBP排泄率,减轻肾脏肥大指数及肾脏的病理损害;2.外源性胰岛素在降低血糖同时,明显降低炎症因子的表达和生成,具有抗炎作用,对糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制除血糖下降外可能与外源性胰岛素抑制肾组织中NF-κB和MCP-1的表达,降低血NF-κB和MCP-1的水平及尿MCP-1的排泄有关;3.优降糖虽有降糖作用,但降低炎症因子表达及对肾脏保护作用不明显。

论文目录

• 中英文缩写对照表
• 中文摘要
• Abstract
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 3.结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 综述
• 参考文献