论文摘要
目的:研究通络方药对糖尿病和肥胖大鼠心肌细胞、主动脉内皮细胞功能的保护作用并进一步探讨其机制。方法:以1型糖尿病、2型糖尿病、肥胖SD大鼠为研究对象,运用HE染色、电子显微镜、酶联免疫吸附分析法（ELISA）、免疫组织化学（IHC）、蛋白印迹（Western）和荧光实时定量—逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）等多种实验方法,多层次研究高胰岛素血症和糖尿病时氧化应激产生的损伤,黏附分子和前炎症因子骨桥蛋白（OPN）的变化,以及通络方药对OPN的影响和对心肌细胞、主动脉内皮细胞的保护作用,并与抗氧化剂a-硫辛酸及调脂药阿托伐他汀的作用进行对照。结果:1)通络方药对糖尿病和肥胖大鼠氧化应激损伤的影响:①明显升高SOD、GSH、T-AOC、CAT,降低MDA水平。②降低血清CRP水平。③降低肥胖和糖尿病大鼠的血脂水平。④使糖尿病组大鼠NO水平较糖尿病组上升显著,但较正常组低。⑤TLR干预组24h尿蛋白较2型糖尿病组明显降低。2)糖尿病大鼠心肌、主动脉组织结构改变:TLR组较2型糖尿病组大鼠心肌、主动脉组织结构改变明显减轻,但较正常组仍有病理改变。3)TLR组大鼠心肌和主动脉iNOS的mRNA表达及其活性较糖尿病组明显增加。4)TLR干预组OPN表达较肥胖和糖尿病组降低显著,肥胖、2型糖尿病组大鼠心肌PKCβ2表达较正常组明显增强,TLR干预组大鼠心肌PKCβ2表达较2型糖尿病组明显减弱,较正常组升高。结论:TLR的干预可以改善糖尿病和肥胖大鼠体内氧化应激系统的紊乱,降低24H尿蛋白、CRP和NO的水平,使大鼠的心肌细胞、主动脉内皮细胞病理结构的改变较糖尿病组明显减轻;还使心肌中PKCβ2表达下降、血浆中OPN降低及心肌、主动脉OPN表达减弱;通过抑制氧化应激、降低CRP和24H尿蛋白,抑制PKC表达,从而下调OPN的表达,增强iNOS的活性,增加NO合成,可能是通络方药发挥内皮保护功能的机制之一。
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