样品放置时间对G6PD活性的影响

样品放置时间对G6PD活性的影响

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)20-0203-02

【摘要】目的了解样本在4℃时不同的保存时间对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性的影响。方法用G6PD/6PGD比值法测定30份全血标本放置各时间段的G6PD活性。结果枸橼酸钠抗凝全血标本在4℃温度下各时间段在24小时内测定G6PD活性无显著性差异(P>0.05)。

【关键词】G6PD活性放置时间G6PD/6PGD比值法

在G6PD活性定量测定中,G6PD/6PGD比值法是检测G6PD活性较准确的方法,尤其适用于对G6PD缺乏杂合子的诊断,是一种较为常用的检测方法。为提高实验的准确性,本文拟探讨G6PD/6PGD比值法在4℃温度下放置不同时间对G6PD活性的影响。

1材料与方法

1.1检测对象来自昆明市延安医院门诊患者随机抽取的30例枸橼酸钠(1:9)抗凝静脉血标本,其中男性14例,女性16例。

1.2仪器与试剂(1)改良葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)测定试剂盒(定量比值法)(由广州米基医疗器械公司生产的同一批号试剂盒),生产批号:G081101-07。(2)721分光光度计(经波长校正、线性检查)。(3)37℃恒温水浴箱。

1.3试剂配制

1.4方法

原理:G6PD催化G6P转化为6PG时,有NADPH生成,因此NADPH的量反映了G6PD活性。NADPH产生后,在PMS递氢的促进下,将NADPH的H传递给氧化型NBT(黄色),使之转变为还原型NBT(蓝色)。蓝色的深浅与NADPH生成量一致,用分光光度计650nm比色(S1)。6PGD也有将NAP转化成NADPH的作用,同法测定6PG生成NADPH的量(S2),通过S1/S2判断NADPH生成的相对含量。

1.5统计学分析测定值以(x-±s)表示,采用SPSS13.0进行单因素方差分析。

2结果

2.130份标本4℃温度放置不同时间段G6PD活性测定结果

2.230份标本放置4℃温度下不同时间段两两间G6PD活性比较

3讨论

G6PD缺乏是新生儿高胆红素血症的主要病因,开展新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的检测可使临床医生对G6PD缺乏症患者及时采取综合性预防措施,避免因出现核黄疸而致的智力低下或死亡等后果,从而提高优生优育水平,因G6PD非急诊项目且新生儿抽血困难,临床采集标本常与急诊生化血常规标本一起采集,故了解G6PD放置时间对活性的影响就尤为重要,不能因为标本放置的原因导致假阳性或假阴性结果。

此次实验选用4个时间段,获得标本后即刻、4℃温度放置4小时、8小时、24小时分别用G6PD/6PGD比值手工法检测,其中1例阳性,29例阴性,检测结果显示在4℃温度下放置24小时内对G6PD酶活性测定无影响。

综上所述,提示临床可以结合实际在标本采集时随急诊生化血常规等标本一起采集后放置4℃冰箱内保存,在24小时内送检验科完成检测,不影响G6PD活性。

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