论文摘要
结直肠癌是临床上常见的恶性肿瘤之一,早期诊治是治疗该病的关键。但目前尚没有有效的可应用于普通人群的筛查方法,临床就诊患者往往已经错失最佳治疗时机。寻找有效的可应用于普通人群的筛查结直肠癌的方法,具有巨大的临床价值和社会意义。第一部分深入探讨临床常用筛查结直肠癌的方法——检测血清CEA、CA19-9浓度的应用价值【研究目的】探讨应用肿瘤标志物进行结直肠癌检测及预后判断的临床应用价值。【资料与方法】汇总本院近3年收治的经手术治疗的结直肠癌患者191例,结合血清及组织学CEA、CA19-9的结果进行分析。【结果】1.归为DukesA期的患者仅占所有就诊的结直肠癌患者的12.57%。2.组织病理切片检查CEA、CA19-9阳性率分别为98.40%、74.24%;血清CEA、CA19-9阳性率分别为51.47%和22.39%;两项指标阳性率组织病理切片明显高于血清,P<0.05。3.血清CEA、CA19-9浓度分别与Dukes分期进行spearman相关分析,两者分别与分期有正相关性。【结论】1.临床收治的结直肠癌患者往往已是中晚期2.检测血清CEA、CA19-9浓度用于诊断、筛查结直肠癌的效果并不理想3.血清CEA、CA19-9的浓度对判断结直肠癌的预后有临床应用价值4.粪便CEA、CA19-9检测可能成为结直肠癌筛查的有效手段。第二部分检测粪便DNA中XAF1基因启动子甲基化状态应用于筛查结直肠癌的方法的建立及评价【研究目的】以粪便DNA中XAF1基因启动子区域的甲基化状态为靶目标,建立新的有效的筛查结直肠癌的方法。【材料与方法】收集需做肠镜检查患者自然排泄粪便,经肠镜或病理学检查确诊后,分为三组,结直肠正常组45例,结直肠腺瘤组30例,结直肠癌组24例,使用QIAamp DNA Stool MiniKit自粪便抽提人DNA,应用MSP方法检测粪便DNA中XAF1基因启动子区域甲基化状态。【结果】经genomic-DNA PCR,证实所提取DNA均含有目的片段。经MSP检测,正常组存在高甲基化15例,阳性率33.33%;腺瘤组18例,阳性率60.00%,两组经卡方检验,P〈0.05,两组率的差异有统计学意义;肠癌组15例,阳性率62.50%,与正常组比较,P〈0.05,两组差异有统计学意义;但结直肠腺瘤组、结直肠癌组阳性率比较,P〉0.05,无显著性差异。【结论】使用Qiagen试剂盒抽提粪便中人基因组DNA的方法比较稳定。本研究显示,XAF1基因启动子甲基化出现于结肠癌的癌前疾病—腺瘤组织中,以粪便DNA中XAF1基因启动子区域甲基化状态为靶目标进行结直肠肿瘤的早期诊断,敏感度、特异度较高;但尚需要大样本的实验研究。第三部分MicroRNA在结直肠腺瘤中表达的初步研究【研究目的】初步探讨miRNA在结直肠腺瘤中是否存在着上调或下调表达,筛选出可能在结直肠癌发生早期发挥作用的miRNA。【研究方法】肠镜下取腺瘤性息肉、正常黏膜组织各1份,抽提RNA后,送广州复能基因有限公司,采用All-in-OneTM qPCR Primer Array检测miRNA的表达,根据筛选的miRNA,在国内外权威网站搜索对应的预测靶基因。【结果】共检测719种miRNA,显著表达差异的有279种,占38.80%;其中hsa-miR-1976、hsa-miR-130a和hsa-miR-503上调或下调达3050倍,且预测靶点包含有与肿瘤发生相关的基因。与XAF1因子相关的hsa-miR-513b miRNA,也升高有3倍以上。【结论】hsa-miR-1976、hsa-miR-130a、hsa-miR-503和hsa-miR-513b可能与结直肠肿瘤的发生有关。
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