禾本科牧草乳酸菌发现及发酵品质检测与动物生产性能影响研究

禾本科牧草乳酸菌发现及发酵品质检测与动物生产性能影响研究

论文摘要

本研究的主要目的,选择禾本科牧草——披碱草和老芒麦为主要研究对象,筛选其中所附着的优良乳酸菌(LAB);经种属鉴定确定其分类;并且将此LAB作为青贮添加剂加入披碱草和老芒麦混合牧草青贮中,研究其对青贮发酵品质的影响;将此微生物培养物作为添加剂,应用于田间青贮生产,研究所调制的青贮对家畜生产性能的影响,阐释其对青贮发酵品质与家畜生产性能改善的机理。为农牧区禾本科牧草高品质利用开辟道路,为畜牧业可持续发展提供有力保证。本研究结果表明,披碱草和老芒麦鲜牧草上附着的微生物主要以一般细菌,酵母菌,霉菌为主,它们的含量均大于106cfu/gFM(每克鲜牧草含菌落单位),乳酸菌的数量较少,最高含量低于5×104cfu/gFM。由此可知,这不能满足常规青贮乳酸菌的最低数量(>105cfu/gFM)需求。因此要想获得优质的禾本科牧草青贮必须额外添加乳酸菌才能主导发酵进行。利用倾注分离法,在披碱草和老芒麦鲜牧草上共分离得到15株乳酸菌,通过形态学,生理生化指标及碳水化合物发酵实验进行筛选、鉴定,最终选择2株过氧化氢酶阴性,产酸迅速,无运动性,可在广泛的温度范围内生长,可以迅速有效的利用各种碳水化合物的优良同型发酵乳酸菌,一株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)S2409,一株为蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtti)S1518。这两株乳酸菌繁殖迅速,在接种后2小时即可进入对数分裂期,最高活菌数接近1010cfu/ml培养液。这些特性对促进作物的乳酸发酵均具有良好的效果。应用分离得到的植物乳杆菌和蒙氏肠球菌作为青贮添加剂,进行披碱草和老芒麦混合牧草青贮发酵特性的研究。试验共分4个处理:对照组(Con),喷洒等量的水;S1518球菌组(Em);S2409杆菌组(Lp);S1518+S2409组(EL)。每处理设8个重复。由实验结果可知,添加乳酸菌可以明显降低青贮pH(p<0.05);明显增加乳酸含量(p<0.05),其中EL组增加效果更显著(p<0.01);丙酸及丁酸的含量明显下降(p<0.05);EL组显著降低青贮中NH3-N含量(p<0.05),Em、Lp组也有降低的趋势,但差异不显著(p>0.05);添加乳酸菌可以降低青贮DM的损失量,Em、Lp以及EL组DM的损失量分别降低0.98、1.32、0.6个百分点;此外调制成青贮可以较好的保存牧草中的β-胡萝卜素含量,但添加组的保存效果低于对照组(p<0.05)。添加乳酸菌可以促进青贮发酵初期迅速的乳酸菌增殖,抑制霉菌和丁酸菌的生长,从整个试验期来看, EL组效果更显著,但对酵母菌没有太大的影响。因此添加乳酸菌可以改善试验牧草青贮发酵品质, EL组对试验牧草青贮品质改善效果最优。应用分离得到的植物乳杆菌和蒙氏肠球菌作为添加剂进行中等规模的无芒雀麦田间青贮生产,进行西门塔尔牛饲喂试验。结果表明,在西门塔尔牛日粮中添加含乳酸菌的无芒雀麦青贮,与饲喂干草的西门塔尔牛组相比可以明显增加DMI(p<0.05),分别为16.71,14.28 kg/d;可以增加乳产量0.52kg/d(p<0.1),明显提高乳中总固形物(p<0.05)以及乳脂肪含量(p<0.05);但对乳蛋白(p>0.05),非脂固形物(p>0.05),乳糖(p>0.05)及酪蛋白(p>0.05)含量均无明显影响;此外干草组和青贮组提供的β-胡萝卜素均可以满足家畜对VA的需求,分别为42.20ug/dl和43.87ug/dl;但是在以无芒雀麦青贮和干草为主要粗饲料来源时,需要额外补充维生素E。补饲LAB添加剂青贮,西门塔尔牛粪中乳酸菌(p<0.1),肠球菌的数量有增加的趋势(p<0.1),大肠杆菌数量呈下降趋势(p<0.1),对一般细菌的数量基本无影响(p>0.05)。综上所述,饲喂添加植物乳杆菌和蒙氏肠球菌的无芒雀麦青贮可以提高西门塔尔牛的生产性能。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 引言
  • 1.1 青贮饲料的独特优势
  • 1.2 青贮微生物学
  • 1.2.1 青贮原料上附着的微生物
  • 1.2.2 不同微生物在青贮不同阶段的变化
  • 1.2.3 青贮中乳酸菌的分类
  • 1.2.4 青贮中乳酸菌生态学
  • 1.2.5 青贮二次发酵
  • 1.3 青贮添加剂
  • 1.3.1 乳酸菌青贮添加剂的分类
  • 1.3.2 乳酸菌青贮添加剂对青贮发酵品质的改善
  • 1.3.3 加入乳酸菌青贮添加剂的青贮对家畜生产性能的影响
  • 1.3.4 LAB 添加剂对家畜生产性能改善的机理
  • 1.4 立题依据及研究意义
  • 1.4.1 立题依据
  • 1.4.2 研究意义及目的
  • 1.5 技术路线流程
  • 2 试验一 老芒麦、披碱草所附着微生物的检测及优良乳酸菌的筛选
  • 2.1 材料和方法
  • 2.1.1 试验材料
  • 2.1.2 试验用培养基
  • 2.1.3 试验方法
  • 2.2 试验结果
  • 2.2.1 青贮牧草上附着的不同微生物
  • 2.2.2 优良乳酸菌的筛选
  • 2.3 分析与讨论
  • 2.4 小结
  • 3 试验二 两株优良LAB 的鉴定及基本生长特性检测
  • 3.1 材料和方法
  • 3.1.1 试验材料
  • 3.1.2 试验方法
  • 3.2 结果与分析
  • 3.2.1 种属的鉴定
  • 3.2.2 中科院微生物研究所的鉴定结果
  • 3.2.3 生长曲线
  • 3.3 小结
  • 4 试验三 添加植物乳杆菌和蒙氏肠球菌对披碱草与老芒麦混合牧草青贮发酵品质的影响
  • 4.1 材料与方法
  • 4.1.1 试验材料
  • 4.1.2 试验设计
  • 4.2 样品采集与分析
  • 4.2.1 样品的采集与测定指标
  • 4.2.2 测定方法
  • 4.3 统计分析
  • 4.4 结果与分析
  • 4.4.1 LAB 添加剂对牧草发酵品质的影响
  • 4.4.2 牧草青贮前后化学成分的变化
  • 4.5 讨论
  • 4.5.1 LAB 添加剂对青贮中pH 值、LA 及VFA 含量的影响
  • 4.5.2 LAB 添加剂对DML 的影响
  • 4.5.3 LAB 添加剂对青贮中氨态氮含量的影响
  • 4.5.4 LAB 添加剂对青贮发酵品质的影响
  • 4.5.5 LAB 青贮添加剂对青贮饲料中β-胡萝卜素含量的影响
  • 4.5.6 LAB 青贮添加剂对青贮中不同微生物变化的影响
  • 5 试验四 添加植物乳杆菌和蒙氏肠球菌对几种常见牧草青贮发酵品质的影响
  • 5.1 材料和方法
  • 5.1.1 试验材料
  • 5.1.2 样品采集与分析
  • 5.2 统计分析
  • 5.3 结果与分析
  • 5.3.1 蒙氏肠球菌和植物乳杆菌对苜蓿青贮发酵品质的影响
  • 5.3.2 蒙氏肠球菌和植物乳杆菌对羊草发酵品质影响
  • 5.3.3 蒙氏肠球菌和植物乳杆菌对无芒雀麦发酵品质影响
  • 5.4 讨论
  • 5.4.1 蒙氏肠球菌和植物乳杆菌对苜蓿青贮发酵的影响
  • 5.4.2 蒙氏肠球菌和植物乳杆菌对羊草发酵品质影响
  • 5.4.3 蒙氏肠球菌和植物乳杆菌对无芒雀麦发酵品质的影响
  • 5.5 小结
  • 6 试验五 添加LAB 的无芒雀麦青贮对西门塔尔牛生产性能的影响
  • 6.1 材料和方法
  • 6.1.1 试验材料
  • 6.1.2 试验方法
  • 6.2 统计分析
  • 6.3 结果与分析
  • 6.3.1 青贮牧草发酵品质
  • 6.3.2 无芒雀麦干草和青贮对西门塔尔牛 DMI,DM 消化率的影响
  • 6.3.3 无芒雀麦干草和青贮对乳产量及乳成分的影响
  • 6.3.4 无芒雀麦干草和青贮对西门塔尔牛血浆中VA,VE 浓度的影响
  • 6.3.5 无芒雀麦青贮对西门塔尔牛粪中不同微生物数量的影响
  • 6.4 讨论
  • 6.4.1 青贮发酵品质
  • 6.4.2 无芒雀麦青贮对西门塔尔牛DMI 和DM 消化率的影响
  • 6.4.3 无芒雀麦青贮对西门塔尔牛乳产量及乳成分的影响
  • 6.4.4 无芒雀麦青贮对西门塔尔牛对血浆中VA 和VE 的影响
  • 6.4.5 无芒雀麦青贮对西门塔尔牛粪中微生物的影响
  • 6.5 小结
  • 7 论文总体结论
  • 8 本研究的创新点
  • 9 有待进一步研究的问题
  • 致谢
  • 作者简介
  • 相关论文文献

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