梅毒抗体应用TP-ELISA法和TRUST法检测的对比

梅毒抗体应用TP-ELISA法和TRUST法检测的对比

醴陵市邦和单采血浆有限公司湖南醴陵412200

摘要:目的:对比梅毒抗体应用酶联免疫吸附试验法(ELISA法)和甲苯胺红不加热血清试验法(TRUST法)的检测效果。方法:选取396份疑似梅毒螺旋体感染患者血清作为检测样本,分别应用TP-ELISA法和TRUST法检测梅毒抗体,以TPPA法检测TP-ELISA法阳性和/或TRUST法阳性的检测样本。结果:在396份疑似梅毒螺旋体感染患者血清中,TP-ELISA法阳性检出率为41.67%,TRUST法阳性检出率为24.49%,具有显著性差异(P<0.05);TP-ELISA法和(或)TRUST法检出阳性的检测样本共198份,在TP-ELISA法和TRUST法均为阳性的79份检测样本中,TPPA法检测均为阳性;在TP-ELISA法阳性、TRUST法阴性的88份检测样本中,TPPA法检出阳性71份;在TP-ELISA法阴性、TRUST法阳性的31份检测样本中,TPPA法检测全部阴性。结论:TP-ELISA法对梅毒抗体的阳性检出率大于TRUST法,TRUST法在检测梅毒抗体存在假阴阳性,而TP-ELISA法不存在假阴性,假阳性的机率较低,对献血筛检的价值大于TRUST法。

关键词:梅毒抗体;TP-ELISA法;TRUST法

梅毒螺旋体作为梅毒的唯一传染源,具有极强的传染性及毒力,对梅毒特异性抗体进行血清学检测,对梅毒患者进行早诊断、早治疗作为治愈梅毒的重要环节[1]。梅毒抗体检测作为实验诊断梅毒的主要方法,检出率、敏感度及特异度均较高,与梅毒螺旋体IgG抗体和IgM抗体阳性密切相关。目前,酶联免疫吸附试验法(ELISA法)和甲苯胺红不加热血清试验法(TRUST法)作为检测梅毒抗体的常用方法,但两种检测方法的检出率、敏感度及特异度均存在差异性。对此,为进一步提高对梅毒抗体的检测效果,本研究旨在对比梅毒抗体应用TP-ELISA法和TRUST法的检测效果。

1材料与方法

1.1一般资料

选取我站于2010年9月~2014年9月期间,检测到396例疑似梅毒螺旋体感染患者的血清作为检测样本,其中男43例、女15例;年龄范围18~55岁、平均年龄41.5±3.5岁。

1.2试剂与仪器

TRUST的梅毒抗体诊断试剂,由上海荣盛生物技术有限公司提供;ELISA的梅毒抗体诊断试剂盒,由珠海丽珠试剂股份有限公司提供;使用仪器:雷勃MK3酶标仪、深圳汇松洗板机。

1.3检测方法

所有受试者均在空腹状态下抽取5mL的静脉血,以转速5000r/min进行离心5min,分离血清;采取TP-ELISA法和TRUST法检测梅毒抗体,分别选用TRUST的梅毒抗体诊断试剂、ELISA的梅毒抗体诊断试剂盒,严格按照说明书要求,对96例疑似梅毒螺旋体感染患者的血清进行检测,记录两种检测方法的检出率、准确率及特异度。

1.4数据处理

采用SPSS12.0软件处理实验数据,计数资料使用χ2检验;以P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1两组方法对梅毒抗体的检出情况对比

在396份疑似梅毒螺旋体感染患者血清中,TP-ELISA法检出阳性165份,阳性检出率为41.67%;TRUST法检出阳性97份,阳性检出率为24.49%;TP-ELISA法和TRUST法对梅毒抗体的阳性检出率具有显著性差异(P<0.05);详情见表1。

2.2两组方法检测阳性样本的TPPA法确认

TP-ELISA法和(或)TRUST法检出阳性的检测样本共198份,在TP-ELISA法和TRUST法均为阳性的79份检测样本中,TPPA法检测均为阳性;在TP-ELISA法阳性、TRUST法阴性的88份检测样本中,TPPA法检出阳性71份;在TP-ELISA法阴性、TRUST法阳性的31份检测样本中,TPPA法检测全部阴性;详情见表2。

3讨论

梅毒螺旋体感染患者后,梅毒抗体作为机体免疫应答的产物,以抗心磷脂和特异性抗体为主。抗心磷脂作为非特异性抗体,作为特异性抗体刺激机体所诱发的免疫应答产物。TRUST法属于梅毒非特异性试验,以梅毒螺旋体的类脂质作为抗原,旨在检测抗心磷脂抗体[2]。由于抗心磷脂的表达水平与梅毒分期、临床疗效、预后密切相关,通过TRUST法检测抗心磷脂而诊断梅毒螺旋体感染的检测效果受到多种因素的影响。孙红[3]研究指出,一期梅毒、三期梅毒患者的抗心磷脂抗体的检出率较低或处于阴性状态,采取TRUST法检测梅毒抗体不具有临床可行性。此外,抗心磷脂抗体的滴度与病程密切相关,在梅毒螺旋体感染期、复发期及治疗期的TRUST法对梅毒抗体的检出率均具有显著性差异。

ELISA法通过基因重组梅毒螺旋体特异性抗原,可单独或同时检测梅毒IgG抗体和IgM抗体,通过酶催化效果,显著提高对梅毒IgG抗体和IgM抗体的检出率、准确率及特异度[4]。由于梅毒IgG抗体和IgM抗体均作为特异性免疫应答产物,通过检测梅毒抗体,作为特异性诊断梅毒螺旋体感染的主要方法。梅毒IgG抗体在梅毒螺旋体感染期间始终处于阳性状态,作为判定梅毒螺旋体感染机体、判断疗效及预后的观察指标;梅毒IgM抗体作为梅毒螺旋体感染后最早产生的免疫应答标记物,并维持在一定水平,随着病情的好转或恶化而变化。此外,采取ELISA法检测梅毒抗体过程,具有操作简便、自动化程度及标准化程度高,可减少不良因素的影响,可批量检测样本,作为临床筛查梅毒螺旋体感染的重要方法。

在本研究中,在梅毒抗体检测中,TP-ELISA法阳性检出率显著大于TRUST法;此外,TP-ELISA法和(或)TRUST法检出阳性的检测样本共198份,在TP-ELISA法和TRUST法均为阳性的79份检测样本中,TPPA法检测均为阳性;在TP-ELISA法阳性、TRUST法阴性的88份检测样本中,TPPA法检出阳性71份;在TP-ELISA法阴性、TRUST法阳性的31份检测样本中,TPPA法检测全部阴性;提示TP-ELISA法对梅毒抗体的阳性检出率大于TRUST法,TRUST法在检测梅毒抗体存在假阴阳性,而TP-ELISA法不存在假阴性,假阳性的机率较低,对献血筛检的价值大于TRUST法。

参考文献:

[1]董亚平,任朝阳,吴新宏等.TP-ELISA法与TRUST法检测梅毒抗体的比较分析[J].基层医学论坛,2014,17(35):4834-4835.

[2]李仕娟.TRUST与TP-ELISA同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用[J].中外医学研究,2011,09(22):50-51.

[3]孙红,朱安友,郭普等.TP-ELISA、TRUST和TPPA联合检测在梅毒诊断中的应用[J].蚌埠医学院学报,2015,40(10):1392-1394.

[4]花南霞,苏志文.TP-ELISA法与TRUST法同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用[J].检验医学与临床,2012,09(16):2079-2080.

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