创新药物益母草碱质量控制和稳定性研究

论文摘要

药物质量控制和稳定性研究是药物临床前研究的一个重要内容。药品质量标准研究过程中,需要对药品的质量做一个全面的检查,保证药品质量的安全和可靠,保证临床前研究和临床研究的顺利进行,以至药品上市后的用药安全。药品的贮藏条件,药品在一定条件下贮藏多长时间仍有效,即药品的有效期等内容都是通过药品稳定性研究来确定。本文在《中国药典》和国家有关药品质量研究的技术规定的指导下,对创新药物益母草碱的质量标准和稳定性进行了系统的研究,初步建立了益母草碱的质量标准（草案）。本论文涉及到的样品通过元素分析、紫外光谱、红外光谱、核磁共振（13C、1H）和质谱,对益母草碱进行结构确证,确证结构正确,为质量标准和稳定性研究提供了可靠的原料,本论文分为以下二篇,其中第一篇为主论文,创新药物益母草碱质量控制及稳定性研究,第二篇为副论文,柱前衍生化技术在生物样品中的应用。第一篇创新药物益母草碱质量控制及稳定性研究1、益母草碱质量控制研究本部分论文根据《中国药典》和有关新药质量标准研究的技术规范对益母草碱进行质量标准研究。建立了益母草碱质量标准研究方法和内容,根据益母草碱的结构和性质,选择合适的方法对其进行质量控制。进行了溶解度、熔点、吸收系数、鉴别、无机杂质检查、水分、吸湿增重、炽灼残渣等项目的研究,确定相应项目的检测方法和结果。检测结果符合《中国药典》2010版的有关规定。首次建立了益母草碱的有机溶剂残留的检查方法、有关物质检查的方法和含量测定的方法,分别进行方法学的验证,并将其用于益母草碱的相关内容的测定。益母草碱样品经质量控制研究,有机溶剂残留检查中石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烷和二甲基甲酰胺未检出,甲醇、乙醇、冰醋酸的残留量符合药典规定。有关物质检查结果在0.89-0.98%之间。重量法、紫外分光光度法和高效液相色谱法测定益母草碱的含量,均大于99%。结果符合国家有关原料药质量标准的规定。2、益母草碱稳定性研究本部分论文根据药物稳定性试验指导原则,对益母草碱进行稳定性研究。分别进行影响因素试验、加速试验和长期试验。对稳定性样品的性状、主成分含量和有关物质含量进行分析。通过试验发现,益母草碱对强光、高温和高湿条件下均稳定,但由于样品具有一定引湿性,故不宜在高湿条件下保存。益母草碱经过在40℃,湿度75%±5%条件下的加速试验后,性状未发生变化,有关物质从0.94%增加到1.13%,主成分含量从99.93%减少到99.04%。经过25℃,湿度60%的长期试验后,有关物质增加到1.17%,主成分含量为99.08%。益母草碱的有效期以长期试验结果为准,目前样品保存的时间为6个月,已经有0、3、6个月的数据。对长期试验的结果进行有效期进行统计学分析后,益母草碱的主成分含量达到98.5%时,保存时间为12.3个月,即益母草碱原料药主成分含量达到98.5%时的有效期可以暂定为一年,具体的有效期以长期试验测定结果为准。根据稳定研究结果,益母草碱需在干燥、凉暗处保存。3、益母草碱质量标准草案及起草说明根据前两节的研究内容,起草并制订益母草碱质量标准草案及起草说明,为益母草碱的质量控制提供规范和依据。第二篇柱前衍生化技术在生物样品中的应用——柱前衍生化测定大鼠血浆中的盐酸美金刚胺的含量本部分论文建立了一种柱前衍生化-HPLC法测定盐酸美金刚胺在血浆中浓度的方法,并将其用于测定大鼠的药-时曲线。通过衍生化反应条件的优化选择,选择最佳的反应条件为pH10.0, FMOC-Cl浓度为8mM,反应时间30min。在此条件下,盐酸美金刚胺浓度在0.025～5.0μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9999）。检测限（S/N=3）为10 ng/ml。该方法灵敏度高,选择性好,能够快速、简便地测定盐酸美金刚胺在血浆中的浓度,该方法能够用于测定大鼠灌胃给药后的药-时曲线,且结果准确、可靠且成本低廉。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一篇
• 前言 创新药物益母草碱的质量控制及稳定性研究的选题背景
• 第一节 益母草碱质量控制研究
• 一、试样样品
• 二、性状研究
• 2.1、外观
• 2.2、色、臭、味
• 2.3、溶解度
• 三、物理常数测定
• 3.1、熔点
• 3.2、吸收系数
• 四、鉴别方法的建立
• 4.1、沉淀反应
• 4.2、三氯化铁呈色反应
• 4.3、紫外扫描鉴别
• 4.4、红外光谱鉴别
• 五、一般杂质检查
• 5.1、氯化物
• 5.2、硫酸根
• 5.3、铁盐
• 5.4、重金属
• 5.5、砷盐
• 5.6、水分
• 5.7、干燥失重
• 5.8、吸收增重
• 5.9、炽灼残渣
• 六、有机溶剂残留检查
• 6.1、实验条件
• 6.2、方法学评价
• 6.3、样品测定
• 6.4、讨论
• 七、有关物质检查
• 7.1、益母草碱合成路线
• 7.2、色谱系统1
• 7.3、色谱系统2
• 八、益母草碱含量测定方法的建立与选择
• 8.1、重量法
• 8.2、紫外分光光度法
• 8.3、HPLC法
• 8.4、含量测定方法的比较与选择
• 九、小结
• 第二节 益母草碱稳定性研究
• 一、影响因素试验
• 1.1、强光照射试验（照度45001x±5001x）
• 1.2、高温试验（温度60℃）
• 1.3、高湿度试验（相对湿度70%±5%）
• 二、加速试验
• 2.1、加速试验（40℃±2℃,相对湿度75%±5%）
• 三、长期试验（25℃±2℃,相对湿度为60%±10%）
• 四、有效期统计分析
• 五、小结
• 第三节 益母草碱原料药质量标准（草案）及起草说明
• 一、益母草碱原料药质量标准（草案）
• 二、益母草碱对照品质量标准草案
• 三、益母草碱原料药质量标准（草案）起草说明
• 第二篇 柱前衍生化技术在生物样品中的应用
• 一、材料和方法
• 1.1、材料和试药
• 1.2 色谱条件
• 1.3、溶液配制
• 1.4、血样预处理
• 1.5、血样采集
• 二、方法评价
• 2.1、色谱方法专属性
• 2.2、标准曲线与检测限
• 2.3、精密度
• 2.4、方法回收率
• 2.5、溶液稳定性
• 三、衍生化条件的优化
• 3.1、pH值的影响
• 3.2、反应时间的影响
• 3.3、FMOC-Cl浓度的影响
• 3.4、硼酸缓冲液浓度的影响
• 四、应用
• 五、小结
• 参考文献
• 附录
• 附录1 综述 生物碱类药物的分析方法综述
• 参考文献
• 附录2 已发表文章
• 致谢