人参次苷H注射液相关指纹图谱研究

论文摘要

人参皂苷Rh2是人参叶、红参、西洋参叶中的微量成分,其单体具有较强的抗癌活性,而且毒性低,其制剂用于抗癌治疗,具有广阔的发展前途。本论文所研究人参次苷注射液是以西洋参叶经提取的西洋参叶总皂苷经降解所得的人参次苷H为原料,以聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸酯-35为辅料,经灌装、灭菌而成的一种无菌制剂,临床上拟用于培元固本,补益气血。抑制肿瘤生长,可改善肿瘤患者的气虚症状,提高免疫功能。用于原发性支气管肺癌之虚症。本论文通过大量实验和文献检索,对西洋参叶供试品溶液的制备进行研究,并依据现行法规和要求,用高效液相色谱法建立了指纹图谱分析条件,对西洋参叶、人参次苷H、人参次苷H注射液指纹图谱进行了系统的研究,并拟定了西洋参叶、人参次苷H、人参次苷H注射液的指纹图谱检测标准草案。制备分离得到人参次苷Rh2单一组分,并进行结构确证,将其作为实验工作对照品使用。根据国家食品药品监督管理局《中药注射剂指纹图谱研究技术指南》、《中药注射剂色谱指纹图谱实验技术指南》和相关文献,通过指纹图谱方法学考查实验,确定了西洋参叶高效液相指纹图谱的最佳色谱条件:色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:A:乙腈, B:水（0.05%磷酸,2%四氢呋喃）。柱温为40℃,进样量为20μL,流速为1.0ml/min,检测波长为203nm;0～18min,A:20%; 18～58min,A:20～40%（线性梯度）; 58～73min,A:40～100%（线性梯度）; 73～80min,100%。试验分析表明:西洋参叶指纹图谱共有14个共有峰,产地为东北（长白、抚松、临江、靖宇和朝阳）之间有优良好的相似性（大于0.9）,产地为山东（莱阳和文登）之间相似性较好,而东北和山东两者之间的相似度略差（0.8～0.9）,因此建议在选用药材时,应尽量选用地域接近的药材,它们之间的相似度较好。人参次苷H原料由西洋参叶总皂苷降解所得,其再经分离、纯化得人参次苷Rh2,样品的理化性质分析显示,熔点,比旋度与文献报道的人参皂苷Rh2一致,并且通过UV、IR、MS、NMR对其结构进行解析,试验得到的数据与文献报道的人参皂苷Rh2一致,确定样品化合物的结构为20（S）—人参皂苷Rh2,可作为对照品使用。以人参次苷Rh2为对照,分别对人参次苷H及其制剂进行指纹图谱研究,通过色谱条件的优化、方法的稳定性、精密度和重复性的研究,建立了人参次苷H与制剂的指纹图谱的色谱条件:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（优选Discovery C18色谱柱）;乙腈-水（含0.1%的磷酸）为流动相,洗脱梯度:0～15min,40～55%乙腈/水;15～55min,55～85%乙腈/水;55～60min,85%乙腈/水;检测波长203nm;柱温40℃。建立了人参次苷H及其制剂的指纹图谱,实验结果表明,本论文建立的指纹图谱检测方法具有良好的稳定性和可靠性,能较好的反映中间体与制剂中活性成分的相关性,可用于对人参次苷H及其制剂的质量进行控制。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 人参次级皂苷研究概况
• 2 对人参皂苷 Rh2的有关研究
• 3 中药指纹图谱研究概述
• 4 本论文研究的目的及意义
• 第一章 西洋参叶药材的指纹图谱
• 1 西洋参叶化学成分的研究概况
• 2 仪器、试剂与材料
• 2.1 仪器
• 2.2 试剂
• 2.3 材料
• 3 药材指纹图谱检测标准草案
• 4 药材指纹图谱检测标准草案的起草说明
• 4.1 名称、汉语拼音
• 4.2 来源
• 4.3 供试品溶液的制备
• 4.4 参照物溶液的制备
• 4.5 色谱条件的选择
• 4.6 方法学考察
• 4.7 检测方法的确定
• 4.8 指纹图谱建立
• 5 药材产地的确定
• 6 小结
• 第二章 人参皂苷 Rh2制备及化学结构确证
• 1 人参皂苷Rh2的制备
• 1.1 人参次苷H 的制备
• 1.2 人参皂苷Rh2的制备
• 2 人参皂苷Rh2的结构鉴定
• 2.1 理化性质
• 2.2 人参皂苷Rh2光谱测定及解析
• 3 小结
• 第三章 人参次苷H 的指纹图谱
• 1 仪器、试剂与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 材料
• 2 人参次苷H 指纹图谱检测标准草案
• 3 人参次苷H 指纹图谱标准（草案）起草说明
• 3.1 名称、汉语拼音
• 3.2 来源
• 3.3 供试品溶液的制备
• 3.4 参照物溶液的制备
• 3.5 色谱条件的选择
• 3.6 方法学考查
• 3.7 检测方法的确定
• 3.8 指纹图谱建立
• 4 小结
• 第四章 人参次苷H 注射液指纹图谱
• 1 仪器、试剂与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 材料
• 2 人参次苷H 注射液指纹图谱检测标准草案
• 3 人参次苷H 注射液指纹图谱标准（草案）起草说明
• 3.1 名称、汉语拼音
• 3.2 来源
• 3.3 供试品溶液的制备
• 3.4 参照物溶液的制备
• 3.5 色谱条件的选择
• 3.6 方法学考查
• 3.7 指纹图谱建立
• 4 指纹图谱相关性分析
• 5 小结
• 结语
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 发表的学术论文