金黄色葡萄球菌IsdB、TRAP和ClfA融合蛋白的免疫保护作用

论文摘要

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）是人和动物的一种重要致病菌。随着S.aureus耐药性菌株的不断出现,使S.aureus感染的治疗越来越困难,因此疫苗接种便成为防治S.aureus感染的重要手段。近年来人们已经研究了S.aureus的许多结构蛋白和致病因子作为疫苗候选抗原,如IsdB、IsdA、Trap、Rap、ClfA、FnbP和Cna等。虽然这些候选抗原都能诱导机体产生较好的免疫应答,但免疫保护效果仍不够理想。为了进一步提高候选抗原的免疫保护作用,本研究将免疫原性较好的S.aureus蛋白IsdB、Trap和ClfA进行融合表达,并对表达产物的免疫应答和免疫保护作用进行研究,为S.aureus疫苗研制提供新的候选抗原。本研究首先对ClfA N2N3及其分段后的ClfAN2和ClfAN3进行表达,经纯化后分别与弗氏佐剂进行乳化,并免疫小鼠研究其免疫保护作用。结果,三种蛋白均可以引起小鼠产生良好的免疫应答,用S. aureus Newman株和HLJ23-1株分别对免疫小鼠攻毒后,ClfAN3、ClfAN2蛋白对小鼠的免疫保护作用与ClfAN2N3蛋白免疫相近。选取ClfAN3与IsdBid和TRAP进行融合表达,表达的融合蛋白命名为ITC,并将此融合蛋白与弗氏佐剂乳化作为免疫原免疫接种小鼠,研究其免疫保护作用。结果,ITC免疫可以引起小鼠产生良好的的免疫应答;分别用S. aureus的Newman株、HLJ23-1株和Wood46株进行攻毒后,重组ITC蛋白免疫组小鼠存活数高于其他各组。重组ITC蛋白具有更好的免疫保护作用,可以作为预防S. aurues感染的候选疫苗抗原。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 金黄色葡萄球菌及其主要致病因子
• 1.2 金黄色葡萄球菌感染的免疫预防
• 1.3 本研究的目的和意义
• 第二章 CLFA分段表达及免疫原性研究
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果
• 第三章 ITC融合蛋白的表达及其免疫保护检测
• 3.1 材料
• 3.2 方法
• 3.3 结果
• 第四章 讨论
• 4.1 CLFA分段表达及免疫原性研究
• 4.2 ITC融合蛋白的表达及其免疫保护研究
• 第五章 结论
• 5.1 CLFA具有免疫保护作用区段的研究
• 5.2 ITC融合蛋白的表达及其免疫保护研究
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 作者简历