纳米粒子免疫层析法在检测异位妊娠和膀胱癌中的应用

纳米粒子免疫层析法在检测异位妊娠和膀胱癌中的应用

论文摘要

纳米科学技术是一种新型的技术,它是20世纪90年代初期逐渐发展起来的。纳米技术是在0.1nm~100nm尺度的空间内,对电子、原子及分子运动规律与特性研究的一种高技术学科。纳米科学技术的应用领域非常广泛,本研究主要介绍它在生命科学中的重要应用。纳米粒子免疫层析法是纳米粒子标记、免疫检测及层析分析技术等多种方法结合在一起的检测技术。该技术具有简单、灵敏、快速、无污染、不需特殊设备及结果判断直观,而且极适合临床医生及野外的现场诊断及家庭的自我检测等优点。异位妊娠是妇产科常见的急重症,对于异位妊娠的早期诊断及治疗是非常重要的。此外近几年来肿瘤的早期诊断是降低肿瘤患者死亡率的重要手段之一,所以对于肿瘤标志物的检测显得尤为重要。本文主要研究了纳米粒子免疫层析技术对人绒毛膜促性腺激素(HCG)的定量检测和对尿纤维连接蛋白(Fn)的快速检测。(1)本实验对制备的纳米金进行了不同方法的表征,也对标记抗体的最佳pH值、最佳标记抗体量分别进行了研究。实验结果表明:最佳pH值为9.0,最佳标记抗体量为180mIU/mL。利用纳米金免疫层析技术研制出的HCG定量检测试纸条,实现了对HCG的定量检测。该试纸条在线性范围内具有较好的线性关系,相关系数R~2=0.9977,重复性也较好,最低检测限可达25mIU/mL。(2)利用量子点免疫层析法制备了定性检测Fn的试纸条,该试纸条具有较高的灵敏性,较强的特异性,能在较短的时间内完成检测等特点,该量子点快速检测试纸条降低了Fn的最低检测限,最低检测限可达150ng/mL,同时对所制备的量子点进行了表征,确定了量子点标记抗体的条件。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 研究意义
  • 1.2 纳米金
  • 1.2.1 纳米金的性质
  • 1.2.2 纳米金的制备
  • 1.3 量子点
  • 1.3.1 量子点的基本定义
  • 1.3.2 量子点的基本结构
  • 1.3.3 量子点的基本特性
  • 1.3.4 量子点的合成
  • 1.4 试验方法及表征手段
  • 1.4.1 Zeta 电位分析仪
  • 1.4.2 透射电子显微镜(TEM)
  • 1.4.3 紫外-可见分光光度计(UV-Vis)
  • 1.4.4 扫描隧道显微镜(STM)
  • 1.5 纳米粒子的应用
  • 1.5.1 纳米金的应用
  • 1.5.2 量子点的应用
  • 1.5.3 免疫层析方法
  • 1.5.4 免疫层析方法的发展趋势
  • 1.6 本论文的研究目的及内容
  • 第二章 纳米金免疫层析法定量检测
  • 2.1 引言
  • 2.2 实验部分
  • 2.2.1 试剂与仪器
  • 2.2.2 制备纳米金
  • 2.2.3 纳米金的表征
  • 2.2.4 确定纳米金标记抗体的最适条件
  • 2.2.5 纳米金免疫层析法的原理
  • 2.2.6 纳米金免疫层析试纸条的制备
  • 2.2.7 HCG 标准溶液和临床样品的检测
  • 2.2.8 HCG 试纸条特异性检测实验
  • 2.2.9 HCG 试纸条精密性检测实验
  • 2.2.10 HCG 试纸条的重复性、稳定性检测实验
  • 2.3 实验结果
  • 2.3.1 纳米金的 Zeta 粒径电位测定、紫外扫描和 TEM 扫描结果
  • 2.3.2 纳米金标记条件的确定
  • 2.3.3 对 HCG 抗原的检测结果
  • 2.3.4 HCG 试纸条特异性检测结果
  • 2.3.5 HCG 试纸条精密性检测结果
  • 2.3.6 HCG 试纸条的重复性、稳定性检测结果
  • 2.4 讨论
  • 2.5 结论
  • 第三章 量子点标记快速免疫层析试纸条检测 Fn 的研究
  • 3.1 引言
  • 3.2 实验方法
  • 3.2.1 试剂与仪器
  • 2荧光微球的合成'>3.2.2 CdTe 量子点的制备和 CdTe/SiO2荧光微球的合成
  • 2荧光微球与 Fn 抗体的偶联'>3.2.3 CdTe/SiO2荧光微球与 Fn 抗体的偶联
  • 3.2.4 量子点免疫层析试纸条的制备
  • 3.2.5 Fn 样品的检测
  • 3.2.6 Fn 试纸条特异性检测实验
  • 3.3 实验结果
  • 3.3.1 量子点的基本表征
  • 3.3.2 量子点与 Fn 抗体偶联的结果
  • 3.3.3 试纸条对 Fn 检测结果
  • 3.3.4 Fn 试纸条特异性检测结果
  • 3.4 讨论
  • 3.5 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 硕士攻读期间论文发表情况
  • 相关论文文献

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