植物多酚类物质对大鼠卵巢衰老的影响

论文摘要

研究目的探讨姜黄素对新生大鼠卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。材料与方法雌性SD大鼠分为母鼠灌胃组(受孕11.5 d母鼠灌胃姜黄素(100 mg﹒kg-1﹒d-1)直至分娩,分别取出生后1、2和4 d龄雌仔鼠卵巢),新生鼠腹腔注射组(正常出生1 d的雌仔鼠腹腔注射姜黄素(100 mg﹒kg-1﹒d-1),连续4 d,分别取出生后2、4 d龄卵巢)和对照组（以母、幼均未用药的正常同天龄新生鼠的卵巢为对照）。所取卵巢经固定、脱水、包埋后切片,应用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin, HE）染色,观察不同发育阶段的卵泡比例,末端脱氧核苷酰基转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling, TUNEL）染色检测卵巢内卵母细胞凋亡情况。结果在1 d龄卵巢中,母鼠灌胃组未装配卵泡的比例明显低于对照组（P < 0.05）而原始卵泡的比例明显增加（P < 0.05）;在2 d龄卵巢中,新生鼠腹腔注射组未装配卵泡比例明显低于对照组（P < 0.01）,而原始卵泡比例则明显高于对照组（P < 0.05）;在4 d龄卵巢中,腹腔注射组的原始卵泡比例显著下降（P < 0.05）,早期初级、发育卵泡比例显著升高（P < 0.01;P < 0.05）。在1、2 d龄卵巢中,母鼠灌胃组和新生鼠腹腔注射组卵母细胞TUNEL阳性率均明显低于对照组（P < 0.05;P < 0.01）。结论姜黄素能加快新生大鼠卵母细胞巢破裂,促进原始卵泡的发育启动,同时能抑制卵母细胞凋亡。研究目的探讨四种植物多酚类物质是否能增加老年大鼠卵巢的卵泡储备,延长其生殖寿命。材料与方法54只11月龄的SD大鼠分为五组,分别为对照组、茶多酚灌胃组(100 mg﹒kg-1﹒d-1)、槲皮素灌胃组(50 mg﹒kg-1﹒d-1)、染料木素灌胃组(160 mg﹒kg-1﹒d-1)和白藜芦醇灌胃组(25 mg﹒kg-1﹒d-1),用药组大鼠每天灌胃一次。每天检查阴道涂片观察动情周期,每周对大鼠称重观察药物对老年大鼠体重的影响,连续进行四个月。实验结束时,所有大鼠麻醉后处死,取卵巢组织进行切片,HE染色观察并分别计数5张有代表性的组织切片中存活和闭锁的卵泡数以及存活卵泡中各级卵泡数占存活总卵泡数的比例。所有数据以x±SEM表示,组间比较用方差分析和卡方检验。结果与对照组相比,茶多酚组存活卵泡总数为27.8±3.2,与对照组（26.9±3.8）相近,但闭锁卵泡总数明显减少（43.4±5.9 vs 79.7±7.5） （P < 0.001）。槲皮素组的存活卵泡总数（36.5±4.1）和闭锁卵泡总数（68.8±6.7）均与对照组相近。另外,与对照组相比,染料木素组和白藜芦醇组的存活卵泡总数均明显增多（42.8±3.9, 51.9±6.4） （P < 0.05, P < 0.001）,而闭锁卵泡均明显减少（58.4±8.0, 51.0±6.2） （P < 0.05, P < 0.01）。结论茶多酚不能促进卵泡存活,且对延缓卵泡发育无明显作用,但能抑制卵泡闭锁。槲皮素对卵泡存活、闭锁以及卵泡发育均无明显影响。染料木素和白藜芦醇都能抑制卵泡发育启动和闭锁,增加老年鼠的卵泡储备,因而可能可以延长老年大鼠的生殖寿命。

论文目录

• 第一部分 姜黄素对新生大鼠卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 前言
• 第二章 实验材料与仪器
• 2.1 实验动物
• 2.2 主要试剂
• 2.3 主要仪器
• 第三章 实验方法
• 3.1 实验动物的饲养
• 3.2 实验用药的配制
• 3.3 卵巢收集和组织切片
• 3.4 苏木精-伊红（HE） 染色
• 3.5 TUNEL 染色
• 3.6 统计学分析
• 第四章 实验结果
• 4.1 姜黄素对新生大鼠卵巢卵泡发育的影响
• 4.1.1 卵泡的组织学分类
• 4.1.2 姜黄素对卵泡发育的影响
• 4.2 姜黄素对新生大鼠卵巢卵母细胞凋亡的影响
• 第五章 讨论
• 5.1 姜黄素对新生大鼠早期卵泡发育的影响
• 5.2 姜黄素对新生大鼠卵母细胞凋亡的影响
• 第六章 结论
• 第二部分 四种植物多酚类物质对老年大鼠卵巢卵泡发育和卵泡闭锁影响的对比研究
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 前言
• 第二章 实验材料与仪器
• 2.1 实验动物
• 2.2 主要试剂
• 2.3 主要仪器
• 第三章 实验方法
• 3.1 实验动物的饲养
• 3.2 实验用药的配制与灌胃
• 3.3 阴道涂片
• 3.4 吉姆萨（Giemsa）染色
• 3.5 卵巢收集及组织切片
• 3.6 苏木精-伊红染色
• 3.7 卵泡分类
• 3.8 统计学分析
• 第四章 实验结果
• 4.1 通过阴道涂片检测老年大鼠的动情周期
• 4.2 药物对老年大鼠卵巢中卵泡储备的影响
• 4.3 药物对老年大鼠卵巢中卵泡发育的影响
• 4.4 药物对老年大鼠体重的影响
• 第五章 讨论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 综述 哺乳动物卵巢细胞凋亡的分子机制
• 附录
• 致谢
• 发表论文情况
• 个人简历