骨髓间质干细胞和新鲜骨髓细胞静脉移植治疗脑梗死的实验观察

论文摘要

目的观察比较大鼠骨髓间质干细胞（rat mesenchymal stem cells, rMSCs）和新鲜骨髓细胞静脉移植入大脑中动脉栓塞的大鼠后在脑内存活、迁移及分化情况,以及对病灶组织结构和神经功能恢复的影响。方法提取新鲜骨髓,体外分离培养rMSCs,流式细胞术检测两月龄鼠原代、第2 代及第4 代rMSCs 表面标志及其动态变化。运用改良Zea Longa 的线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,随机分为对照组、rMSCs 静脉移植组及新鲜骨髓细胞静脉移植组。模型成功后分别于术后24h 经尾静脉,对照组注射磷酸盐缓冲液（PBS）1ml,rMSCs 和新鲜骨髓细胞移植组分别注射CTO（cell tracker orange）标记的rMSCs 细胞悬液和新鲜骨髓细胞悬液1ml。各组大鼠分别于术后24h、移植后1W、2W 应用modified Neurological Severity Scores（mNSS）评分评价治疗前后的神经功能状况,应用荧光激发及免疫组化技术检测rMSCs 和新鲜骨髓细胞在脑内存活、迁移及分化情况。结果rMSCs 体外培养表现出贴壁生长和多态性的特性,培养扩增至第5 代,细胞数可达1-2×1011个。流式细胞术检测rMSCs 原代中CD34、CD45 等有阳性表达,传代后表达率接近于零;CD29、CD90 等表达呈阳性,CD29 的表达率随着细胞传代而逐渐升高,CD90 的表达率则逐渐下降。与对照组对比,rMSCs 及新鲜骨髓细胞移植组大鼠神经功能改善明显,mNSS 评分差异有统计学意义（P<0.001）,而两移植组间mNSS 评分差异没有统计学意义（P>0.05）。移植后2W组织学观察,与对照组相比移植组梗塞区脑组织结构恢复较好。移植rMSCs 和新鲜骨髓细胞组在荧光激发下均可见CTO 标记的细胞在梗塞区及其周边区聚集并存活,且有部分细胞表达神经元特异性烯醇化酶（NSE）、巢蛋白（nestin）、神经丝蛋白（NF-200）及星型胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）

论文目录

• 1、英文缩语表
• 2、论文摘要（中文）
• 3、论文摘要（英文）
• 4、前言
• 5、材料与方法
• 6、结果
• 7、讨论
• 8、结论
• 9、参考文献
• 10、综述
• 11、致谢