鸡志贺氏菌对β-内酰胺类的耐药机制初步研究

论文摘要

本文研究了产超广谱β-内酞胺酶（ESBLs）志贺氏菌的多重耐药性、耐药质粒与β-内酰胺酶、ESBLs三者之间的关系,探讨志贺氏菌在受控条件下对β-内酰胺类抗生素的耐药机制及耐药质粒在细菌间的传递方式,为兽医临床合理选药、寻找对此菌有效的抗生素及评价抗生素耐酶能力提供理论依据,同时为其他后继耐药研究提供理论基础。内容主要包括:临床分离志贺氏菌株及标准志贺氏菌最小抑菌浓度（MIC）的测定、志贺氏菌的耐药诱导及酶的检测、诱导耐药菌的质粒转化与接合试验、转化子、接合子MIC的测定及酶的检测。 临床常用17种抗菌药对标准志贺氏菌、临床分离菌MIC结果表明:标准志贺氏菌对临床常用17种抗菌药高度敏感。与标准志贺氏菌比较,两株临床分离菌株除对阿莫西林/棒酸（2:1）、庆大霉素、阿米卡星敏感外,对阿莫西林、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦复方制剂（2:1、4:1、8:1）、氟喹喏酮类（环丙沙星、加替沙星、氧氟沙星）、苯唑西林、一代头孢类（头孢氨苄、头孢唑林）、三代头孢类（头孢曲松、头孢噻呋、头孢噻肟）按耐药标准判断已耐药。 阿莫西林等临床常用13种抗菌药对诱导5、10、15、20、25、30代时标准志贺氏菌的MIC结果表明:随诱导代数的增加,MIC值也随之增加,MIC值与诱导代数呈正相关。 20种临床抗菌药对标准志贺氏菌及临床分离菌诱导前及诱导30代后MIC测定结果表明:对所测20种临床抗菌药,标准志贺氏菌高度敏感,临床分离志贺氏菌中、高度敏感。诱导30代后耐药株,其不仅对β-内酰胺类的阿莫西林、氨苄西林、第一代头孢类（头孢氨苄、头孢唑啉）、第三代头孢类（头孢噻呋、头孢噻肟、头孢曲松）耐药,对氨基糖苷类（阿米卡星、庆大霉素）、氟喹喏酮类（环丙沙星、加替沙星、氧氟沙星）亦耐药,且不论是临床分离志贺氏菌还是标准志贺氏菌,其诱导后MIC均大于诱导前MIC的四倍。结合酶的产生分析,诱导后志贺氏菌对β-内酰胺类抗生素的MIC与酶的产生呈正相关。 用nitrocefin纸片法、酸量法、碘量法检测β-内酰胺酶结果表明:诱导5代时的耐药菌,Nitrocefin纸片法能检测到β-内酰胺酶的存在;诱导10代后,三种β-内酰胺酶检测方法均显阳性,且随诱导代数递增,Nitrocefin纸片显色现象越来越明显。 纸片扩散法检测ESBls结果表明:诱导至5、10、15代时,头孢他啶、头孢噻肟检测不到产ESBLs可疑株;诱导20代后,可检测到产ESBLs可疑株的存在,且可确证有产ESBLs菌株的出现。而由双纸片协同法检测ESBls结果表明,六株诱导耐药菌在诱导至15代时,已有协同现象产生。因纸片扩散法存在假阴性,双纸片协同法比纸片扩散法有更高的ESBLs检出率,因此可判定诱导至15代时诱导耐药菌有ESBLs产生。 Vitek-32全自动细菌鉴定系统生化鉴定结果显示:诱导耐药志贺氏菌的耐药质粒可通过转化、接合的方式传递给大肠杆菌BL-21。 阿莫西林等20种临床常用抗菌药对大肠杆菌BL-21转化子、接合子MIC结果表明:与大肠杆菌BL-21比较,六株转化子及六株接合子不仅对β-内酰胺类耐药,对氨基糖苷类、

论文目录

• 摘要
• 1 文献综述
• 1.1 细菌耐药机制研究进展
• 1.2 β-内酰胺酶研究进展
• 1.3 超广谱β-内酰胺酶研究进展
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 志贺氏菌的耐药诱导及酶的检测
• 3.1.1 主要仪器及材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 诱导耐药菌的质粒转化接合试验
• 3.2.1 主要材料及仪器
• 3.2.2 试验方法
• 4 结果与分析
• 4.1 志贺氏菌的耐药诱导及酶的检测结果
• 4.2 诱导耐药菌的质粒转化接合试验
• 5 讨论与结论
• 5.1 志贺氏菌的耐药诱导及酶的检测
• 5.2 诱导耐药菌的质粒转化接合试验
• 5.3 结论
• 参考文献
• 英文摘要