论文摘要
目的 白细胞介素18是新近发现的一种细胞因子,具有显著诱导IFN-γ产生的功能,又称IFN-γ诱生因子。IL-18具有多种生物学功能:促进淋巴细胞的增殖,诱导TH1类细胞因子的产生,增强NK细胞的杀伤活性等。进一步研究表明:IL-18在抗感染、抗肿瘤、免疫调节等方面具有重要作用,显示出广阔的应用前景。故可以将其开发为一种治疗用生物制品。稳定的生产工艺是批量生产的前提,本文就其生产工艺进行研究,建立一种稳定的纯化、复性工艺,为将来的产业化奠定良好的基础。 方法和结果 1.IL-18原核细胞表达系统的建立和高效表达菌株的筛选 成熟的有活性的IL-18有157个氨基酸组成,根据IL-18基因的序列,采用化学合成法合成IL-18的cDNA,重组于表达载体pBV220中,转化大肠杆菌DH5α,筛选获得高效表达工程菌,经仞步检定表达量达30%左右。并对该重组质粒在不同类型的大肠杆菌中的表达情况进行了比较,发现IL-18在BL21中表达稳定,能够满足批量生产的要求。 2.工程菌发酵和IL-18的诱导表达 工程菌内含有表达载体pBV220,其中含有强启动子PLPR,及热敏蛋白基因,可以通过升高温度来诱导蛋白表达。工程菌接种于摇瓶的LB液体培养基中30℃振荡培养,扩增获得一级种子液,再按1%转种扩大培养获得二级种子液,达到一定量后按10%转种于发酵罐中已灭菌的LB+M9培养基中,30℃培养,并通过通气量和搅拌速度控制溶氧、用碱调pH值,适当补料,进一步增菌至一定密度后,升温至42℃热诱导,诱导4h表达IL-18。通过发酵参数的控制,使细菌生长旺盛,并在对数生长
论文目录
相关论文文献
- [1].苏云金芽胞杆菌重组工程菌研究进展[J]. 生物产业技术 2008(02)
- [2].α-葡萄糖苷酶工程菌发酵条件的研究[J]. 食品工业科技 2008(11)
- [3].产(R)-1,3-丁二醇的工程菌构建及转化条件研究[J]. 生物技术 2020(02)
- [4].高效表达内切葡聚糖酶酿酒酵母工程菌的构建[J]. 生物工程学报 2020(10)
- [5].重组人硫氧还蛋白工程菌生物学特性稳定性的检测[J]. 微生物学通报 2013(08)
- [6].谷氨酸棒状杆菌果糖代谢阻断工程菌的构建[J]. 食品科学 2016(21)
- [7].重组海藻糖合酶工程菌高密度发酵条件的研究[J]. 食品工业科技 2012(17)
- [8].重组人B淋巴细胞刺激因子工程菌生物学特性的稳定性[J]. 中国生物制品学杂志 2008(09)
- [9].酿酒酵母工程菌产青蒿酸的发酵动力学研究[J]. 中国酿造 2020(04)
- [10].重组人胰岛素样生长因子-1工程菌发酵培养基的优化[J]. 化学与生物工程 2013(04)
- [11].5L发酵罐高密度培养番茄红素工程菌及其发酵条件优化[J]. 现代食品科技 2020(06)
- [12].虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗工程菌发酵工艺研究[J]. 水产学杂志 2016(06)
- [13].表达重组谷氨酸脱羧酶工程菌发酵条件的优化[J]. 中国生物制品学杂志 2013(01)
- [14].重组人骨形态发生蛋白-7工程菌的高密度发酵[J]. 中国生物制品学杂志 2010(05)
- [15].微囊化不可繁殖型尿酸氧化酶工程菌的制备[J]. 生物技术通讯 2008(06)
- [16].生物强化工程菌的构建及其在石化废水处理中的应用[J]. 环境科学学报 2008(05)
- [17].一株产G418单组分工程菌的构建[J]. 微生物学通报 2015(02)
- [18].细胞工程菌脱除油品中有机硫的实验研究[J]. 石油炼制与化工 2010(11)
- [19].他克莫司工程菌的构建及初步发酵工艺优化[J]. 中国医药工业杂志 2016(02)
- [20].食品级木聚糖酶黑曲霉工程菌的构建[J]. 东北农业大学学报 2013(11)
- [21].苯酚降解工程菌Bacillus subtilis dqly-2的构建[J]. 生物技术 2012(05)
- [22].产顺式-4-L-羟脯氨酸工程菌的构建及转化条件的优化[J]. 微生物学通报 2016(09)
- [23].细胞工程菌脱硫动力学的实验研究[J]. 石油与天然气化工 2011(04)
- [24].高效组成型分泌表达木素过氧化物酶酿酒酵母工程菌的构建[J]. 微生物学报 2020(05)
- [25].产虾青素酿酒酵母工程菌的构建[J]. 中国医药生物技术 2014(06)
- [26].高产γ-氨基丁酸的谷氨酸棒杆菌工程菌的构建和发酵条件优化[J]. 工业微生物 2014(03)
- [27].重组工程菌pET32a-CR1-SCR15-18/BL21(DE3)高密度发酵工艺研究[J]. 第三军医大学学报 2011(09)
- [28].溶氧反馈分批补料高密度培养枯草杆菌谷氨酰胺合成酶工程菌[J]. 南京师大学报(自然科学版) 2010(02)
- [29].2,3-吡啶二甲酰亚胺及其工程菌转化产物的高效液相色谱检测[J]. 色谱 2018(04)
- [30].天冬氨酸激酶工程菌发酵条件的响应面优化研究[J]. 农产品加工(学刊) 2011(07)