论文摘要
胰腺癌是预后最差、死亡率最高的恶性肿瘤之一。胰腺癌极强的侵袭和转移能力与其预后差直接相关。研究胰腺癌这种高度恶性生长扩散方式的机制,从而找到治疗胰腺癌的新方法,是目前医学研究的迫切任务之一。Fascin是进化上高度保守的细胞骨架蛋白,参与细胞膜表面丝状伪足和微刺的形成,在细胞迁移、细胞黏附以及细胞间信息交流等过程中发挥重要作用。文献报道fascin在人类的多种上皮性肿瘤中有不同程度的上调表达。胰腺癌基因差异表达和蛋白质组研究发现,fascin是胰腺癌与正常胰腺组织表达差异最大的基因之一。通过干预fascin表达探讨fascin对胰腺癌细胞生物学行为的影响,目前尚未见研究报道。本研究运用RNA干扰技术,成功找到了fascin的有效干扰位点,构建干扰载体,并建立了稳定干扰克隆细胞系。对稳定干扰克隆细胞的生物学行为研究发现:fascin表达的抑制在体外和体内都可以显著地减慢细胞的增殖速度,在体外实验能使细胞停滞在G1期,而对凋亡没有明显影响;能使胰腺癌细胞的细胞突起和表面微绒毛明显减少,细胞内线粒体显著减少并形成漩涡状排列的板层结构;可以促进细胞的聚集黏附,降低细胞的锚着非依赖性生长能力;fascin表达的抑制可以显著地降低胰腺癌细胞的运动和迁移能力,干扰细胞划痕迁移速度明显减慢,迁移至Transwell Chambers下室的数量明显减少,穿过基质胶侵袭至Invasion Chambers下室的细胞数量明显减少;fascin表达抑制对胰腺癌细胞的E-cadherin、β-catenin、β-actin、vimentin表达没有明显影响,可引起胰腺癌细胞的蛋白水解酶MMP-2表达的下降,而对MMP-9和cathepsin D的表达没有明显影响。本研究结果表明,fascin可以影响胰腺癌细胞的形态、增殖、黏附、锚着非依赖性生长、运动和侵袭,其影响都有利于癌的侵袭和转移。因此,针对fascin表达的干预可能会使胰腺癌肿瘤细胞的侵袭和转移能力下降,有望成为胰腺癌治疗的一个新靶点,从而为胰腺癌的治疗提供了一条新的途径。