论文摘要
油茶（Camellia oleifera Abel）为山茶科（Theacea）山茶属（Camellia L.）植物,是我国特有的油料作物,广泛分布于中国南部,其根、茎、叶、花和籽皆可入药。根据国家发改委等部委联合出台的《全国油茶产业发展规划（2009—2020年）》,到2020年我国油茶种植总规模将达到7000万亩,榨油后的茶籽饼将超过700万吨。目前,茶籽饼少数被用作农药兼肥料等方面,大量的茶籽饼遭到废弃。如果能从茶籽饼中提取分离出油茶籽皂苷,开发综合利用茶籽饼的途径,就可以将其变废为宝。茶皂苷可应用到工业、农业等领域,高纯度的茶皂苷能应用于医药业,去除茶皂苷的饼粕还能做饲料,不仅增加农民收入,也有益于环境保护,产生可观的经济效益和社会效益。国内外学者对山茶属植物各个部位的化学成分及其生物活性做了大量的研究,发现山茶属植物含有丰富的五环三萜类皂苷化合物,其主要活性涉及肠胃活性、抑制乙醇吸收、抗炎、抗过敏、抗高血脂高血压、抑制黑色素形成等。目前已经从山茶属植物中分离鉴定出131种皂苷单体,报道主要集中在茶树（Camellia sinensis）皂苷研究方面,已从茶树各个部位分离鉴定83种皂苷,而有关油茶皂苷结构及活性方面研究的报道较少。至今,从油茶中分离到13种皂苷单体,包括油茶根和花中分别5种,在油茶籽中仅分离到2种新的和1种已知皂苷,而有关油茶籽皂苷单体的活性研究报道更少。因此为提高油茶籽饼综合利用价值,有必要对油茶籽中的皂苷成分进行分离纯化和相关活性开展研究。本文以采集于安徽皖南山区的油茶籽为实验材料,对其中的皂苷成分进行分离纯化及生物学活性研究。研究结果对系统地了解油茶籽中皂苷种类及其活性,综合利用油茶籽资源,开发新农药、新医药具有重要意义。1、以70%乙醇提取油茶籽中的皂苷成分,所得的粗提物经正丁醇萃取、大孔吸附树脂分段、后经正反相硅胶、凝胶色谱等多种色谱手段进行分离纯化,得到油茶籽总皂苷及4种油茶籽皂苷单体,运用波谱分析方法（ESI-MS、NMR、UV）鉴定出Camelliasaponin B1,其他3种皂苷单体结构有待进一步确认。2、利用分离纯化所得的油茶籽总皂苷进行HPLC色谱分离,参照实验已获得的皂苷单体化合物的紫外光谱吸收特性,确定了油茶籽总皂苷的最佳紫外检测波长为278nm,为油茶籽总皂苷定性及含量测定方法建立提供一定的研究基础,也为油茶籽皂苷单体的分离纯化过程提供了方法依据。3、分别对油茶籽粗提物、大孔树脂分段组分和油茶籽总皂苷的根结线虫（Meloidogyne spp.）杀灭活性进行了对比研究,结果显示：油茶籽粗提物和油茶籽总皂苷具有中强杀灭根结线虫的活性,大孔树脂50%乙醇组分具有弱活性,分离过程中所得的非皂苷类组分无杀线活性。实验进一步研究了油茶籽总皂苷对松材线虫（Bursaphelenchus xyluplil us）体内解毒酶,即过氧化氢酶和羧酸酯酶活性的影响。结果表明：油茶籽总皂苷的浓度对于过氧化氢酶和羧酸酯酶的酶活影响最大,当浓度达到1000μg/mL时对两种酶的酶活均达到最大抑制作用,其他因素影响较小。4、油茶籽总皂苷和Camelliasaponin B1的体外抗肿瘤细胞活性研究结果显示,两者在一定浓度下对4种人肿瘤细胞均有良好的抑制作用。Camelliasaponin B1对人白血病HL-60细胞的IC50为1807μmol,人胃癌BGC-823细胞的IC50为25.79μmol,人肝癌Bel-7402细胞的IC50为17.65 μmol,人鼻咽癌KB细胞的IC50为16.54μmol。油茶籽总皂苷对人白血病HL-60细胞的IC50为12.54mg/L,人胃癌BGC-823细胞的IC50为5.98 mg/L,人肝癌Bel-7402细胞的IC50为11.02 mg/L,人鼻咽癌KB细胞的IC50为19.76 mg/L。这为油茶籽总皂苷及其皂苷单体的活性研究及应用提供了重要方向。5、研究了油茶籽总皂苷和Camelliasaponin B1对过氧化氢损伤PC12细胞的保护作用,结果表明：总皂苷和Camelliasaponin B1分别在10mg/mL和10μmol浓度下对过氧化氢损伤的PC12细胞表现出显著的保护活性。Camelliasaponin B1活性与浓度成正相关,总皂苷在0.1mg/mL浓度下也有较好的保护作用,但是保护作用与浓度未呈现相关性。本文研究发现油茶籽中皂苷种类和含量丰富,经实验证实其具有多种生物活性,对油茶饼粕的综合利用提供了研究思路,认为有进一步研究的意义和推广应用价值。