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一株八角莲内生真菌次生代谢产物的化学成分及紫贻贝HPLC化学指纹图谱研究

2020-12-14阅读(473)

一株八角莲内生真菌次生代谢产物的化学成分及紫贻贝HPLC化学指纹图谱研究

论文摘要

植物内生真菌是一个物种多样性十分丰富的微生物类群。由于长期生活在植物体内,内生真菌与寄主植物协同进化,并在演化的过程中建立起互惠共存、相互制约的共生关系。这种共生关系,使内生真菌与植物在化学成分上表现出一定的相同性和相似性。八角莲（D. versipellis）是小檗科（Berberidaceae）八角莲属（Dysoma）多年生草本植物,广泛分布于江西、湖北、湖南、贵州、四川等省区,是我国特有的药用植物。现从八角莲属植物中分离得到的化学成分有木脂素类、黄酮类、醌类、甾醇类、氨基酸类等化合物;具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌消炎等药理作用。但到目前为止,少见对其内生真菌的化学成分及生物活性的研究报道。鉴于八角莲植物优良的药理学活性,为寻找抗肿瘤活性的单体成分,本文对一株位于八角莲根部的内生真菌进行了系统的化学成分研究。运用薄层层析（TLC）、硅胶柱层析（CC）、凝胶柱层析（Sephadex LH-20）、反相柱层析（ODS）和半制备高效液相（HPLC）等现代分离手段,从八角莲内生真菌次生代谢产物的乙酸乙酯提取物中,共分离得到了个22化合物,利用现代波谱技术:核磁共振（1D,2D NMR）、质谱（EI-MS、ESI-MS等）确定了其中16个化合物的结构,分别为:β-谷甾醇（1）,胆甾醇（2）,5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-醇（3）,5α,8α-过氧化麦角甾-6,9,22-三烯-3β-醇（4）,麦角甾-4,6,8（14）,22-四烯-3-酮（5） , ganodemasides B（6） ,5a,6a-epoxy-3β-hydroxy-（22E）-ergosta-8（14）,22-dien-7-one（7）,豆甾醇（8）,（Z）-豆甾-5,24（28）-二烯-3β-醇（9）,正十六烷酸（10）,（Z）-9-十八碳烯酸（11）,9-Octadecenoic acid （Z）-,2-hydroxy-3-[（1-oxohexadecyl）oxy]propyl ester （12）, 9-Octadecenoic acid （Z）-, 2-hydroxy-3-[（1-oxooctadecyl）oxy]propyl ester （13）,十六烷酸单甘油酯（14）,油酸单甘油酯（15）,腺嘌呤核苷（16）。我国是一个海洋生物资源丰富的国家,将海洋生物用作药物的历史也由来已久。作为传统中药的一部分,海洋药物在质量控制上一直缺乏科学的检验手段。近年来,随着中药指纹图谱技术的出现,在阐明中药化学成分的多样性和复杂性方面取得了很大的进展,为解决中药质量控制带来了希望。紫贻贝（Mytilus edulis linnaeus）俗名海红、淡菜等,是我国传统的海洋药用生物。现代研究表明,紫贻贝富含氨基酸、多聚不饱和脂肪酸、维生素等成分,不仅营养价值较高,而且具有降血压、防止动脉硬化、抗炎、增强免疫力等保健功能。本实验以采集于山东沿海不同地区的9批紫贻贝样品为研究对象,采用高效液相色谱法,通过色谱条件的优化、提取工艺的考察和系统适应性试验,建立了紫贻贝的HPLC化学指纹图谱,并标定了其中的13个共有峰。系统适应性试验的相对标准偏差值均小于5%,达到了指纹图谱建立的要求。并运用建立的紫贻贝的HPLC指纹图谱对未知样品进行鉴定,结果证明建立的紫贻贝HPLC化学指纹图谱可用于快速的定性物种鉴别。通过对传统中药紫贻贝的化学指纹图谱研究,首次建立了其HPLC化学指纹图谱,为进一步研究其药用有效成分和进行快速的真伪鉴别提供了科学的依据。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一部分 一株八角莲内生真菌次生代谢产物的化学成分研究
  • 前言
  • 第一章 八角莲属植物的化学成分、药理作用概述
  • 1.1 八角莲属植物的化学成分研究进展
  • 1.2 八角莲属植物的药理学研究
  • 1.3 立题的目的与意义
  • 参考文献
  • 第二章 八角莲内生真菌次生代谢产物的化学成分及生物活性研究
  • 2.1 概述
  • 2.2 论文中分离得到的化合物
  • 2.3 化合物结构解析
  • 2.4 实验部分
  • 2.5 生物活性实验
  • 2.6 实验小结
  • 参考文献
  • 第二部分 紫贻贝 HPLC 化学指纹图谱研究
  • 前言
  • 第一章 中药指纹图谱技术概述
  • 1.1 指纹图谱技术的起源与发展
  • 1.2 中药指纹图谱的定义、特征及分类
  • 1.3 中药指纹图谱建立的意义和原则
  • 1.4 中药指纹图谱的研究现状
  • 第二章 紫贻贝 HPLC 化学指纹图谱的建立
  • 2.1 仪器试剂及药材
  • 2.2 色谱条件的建立
  • 2.3 提取工艺考察
  • 2.4 供试品溶液的制备方法
  • 2.5 指纹图谱方法验证
  • 2.5.1 专属性试验
  • 2.5.2 耐用性试验
  • 2.5.3 精密度试验
  • 2.5.4 稳定性试验
  • 2.5.5 系统适用性试验
  • 2.6 指纹图谱的确立与应用
  • 2.6.1 参考指纹图谱的建立
  • 2.6.2 确定特征峰
  • 2.6.3 特征峰相对保留时间及相对峰面积的确定
  • 2.6.4 样品真伪的鉴别
  • 2.7 小结与讨论
  • 参考文献
  • 结语与展望
  • 缩略语注释
  • 附图
  • 致谢
  • 个人简历
  • 发表的学术论文

    • 相关论文文献

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