金边瑞香活性成分提取分离及抗氧化活性研究

论文摘要

金边瑞香（Daphne odora Var.marginata）系瑞香科瑞香属常绿小灌木,具有观赏价值以及多种利用价值,可作造纸原料,可提取芳香油。民间常用金边瑞香叶捣烂敷患处,治疗溃烂、无名肿毒、乳腺炎等;其花在白酒中浸泡后可用于治疗牙痛、风湿性关节炎以及因损伤引起的肿痛和各种无名疼痛等。近代医学研究表明,金边瑞香具有抑菌、抗炎、抗风湿、耐缺氧、抗脂质过氧化、延缓衰老和调节免疫等药理活性。本论文对金边瑞香的化学成分进行了初步研究,并采用各种化学及生物模型考察了其抗氧化活性,以期为金边瑞香的开发利用提供理论基础。本论文共分七个章节,主要内容如下:第一章绪论部分,综述了近年来国内外研究体外抗氧化及清除自由基能力几种化学模型的原理及应用;概述了金边瑞香化学成分及药理活性研究进展。第二章采用溶剂萃取法对全植株金边瑞香原料进行组分化提取。第三章采用五种化学模型评价了金边瑞香四种提物清除超氧自由基、DPPH自由基、羟基自由基、还原铁离子以及鳌合亚铁离子的能力。测定了各组分的总黄酮含量,并探讨了总黄酮含量与各活性之间的相关性。第四章通过薄层色谱对洗脱溶剂进行筛选,采用硅胶柱层析对活性较强的乙酸乙酯提取物进行分离,得到三个子组分,采用反相高效液相色谱法分别测定了金边瑞香乙酸乙酯组分以及三个子组分的化学组成及其含量。第五章采用六种化学和生物模型评价了金边瑞香乙酸乙酯提取物及其子组分清除超氧自由基、DPPH自由基、羟基自由基、还原铁离子、鳌合亚铁离子的能力以及对羟基自由基引起的DNA损伤的保护作用。初步探讨了化学组成及含量与各活性之间的相关性。同时测定了各组分的总黄酮、总酚含量,并讨论了它们与各活性之间的相关性。第六章采用Sephadex LH-20柱层析对活性较强的组分F2进行分离纯化,通过制备HPLC得到两个单体化合物。第七章对整个实验结果进行了总结,对今后的实验和研究进行了展望。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 清除超氧自由基
• 1.2.1 邻苯三酚自氧化法
• 1.2.1.1 原理
• 1.2.1.2 应用
• 1.2.2 改进的邻苯三酚自氧化法
• 1.2.2.1 邻苯三酚—鲁米诺发光体系
• 1.2.2.2 邻苯三酚—极谱法
• 1.2.3 氮蓝四唑（NBT）还原法
• 1.2.3.1 氮蓝四唑光化还原法
• 1.2.3.2 还原型辅酶-吩嗪硫酸甲酯-氮蓝四唑体系
• 1.2.4 黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系
• 1.2.4.1 黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-氮蓝四唑体系
• 1.2.4.2 黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-细胞色素c体系
• 1.2.4.3 黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-电子自旋共振体系
• 1.2.5 肾上腺素自氧化法
• 1.2.5.1 原理
• 1.2.5.2 应用
• 1.3 清除DPPH自由基
• 1.3.1 原理
• 1.3.2 应用
• 1.4 清除羟基自由基
• 1.4.1 比色法（光度法）
• 1.4.1.1 α-脱氧核糖法
• 1.4.1.2 基于Fenton反应的其它光度法
• 1.4.2 荧光法
• 1.4.3 化学发光法
• 1.4.4 使用电子自旋捕获技术的体系
• 1.4.5 高效液相法
• 1.5 还原能力
• 1.5.1 还原铁离子
• 1.5.2 还原铜离子
• 1.6 螫合亚铁离子的能力
• 1.7 金边瑞香的生物学特征
• 1.8 金边瑞香研究进展
• 1.8.1 金边瑞香化学成分研究概况
• 1.8.2 金边瑞香药理活性研究进展
• 1.8.2.1 抗炎症所用
• 1.8.2.2 耐缺氧作用
• 1.8.2.3 抗脂质过氧化和抗衰老作用
• 1.8.2.4 镇痛作用
• 1.8.2.5 抑菌作用
• 1.8.2.6 调节免疫作用
• 1.8.2.7 金边瑞香的其他应用研究
• 1.9 本课题研究的价值及意义
• 1.9.1 课题来源
• 1.9.2 研究价值及意义
• 参考文献
• 第二章 金边瑞香水醇相提取物组分化
• 2.1 引言
• 2.2 仪器、试剂及材料
• 2.2.1 仪器
• 2.2.2 试剂及材料
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 逆流技术提取金边瑞香化学成分
• 2.3.2 金边瑞香水醇相提取物组分化
• 2.3.3 金边瑞香水醇相提取物HPLC分析
• 2.4 本章小结
• 参考文献
• 第三章 金边瑞香组分化提取物抗氧化及清除自由基活性
• 3.1 引言
• 3.2 仪器、试剂及材料
• 3.2.1 仪器
• 3.2.2 试剂及材料
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 样品的制备
• 3.3.2 总黄酮含量的测定
• 3.3.3 清除超氧自由基
• 3.3.4 清除DPPH自由基
• 3.3.5 清除羟基自由基
• 3.3.6 还原铁离子的能力
• 3.3.7 螯合亚铁离子的能力
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 概述
• 3.4.2 总黄酮含量
• 3.4.3 清除超氧自由基
• 3.4.4 清除DPPH自由基
• 3.4.5 清除羟基自由基
• 3.4.6 还原铁离子的能力
• 3.4.7 螯合亚铁离子的能力
• 3.4.8 总黄酮含量与各活性之间的相关性
• 3.5 本章小结
• 参考文献
• 第四章 金边瑞香乙酸乙酯提取物硅胶柱层析分离
• 4.1 引言
• 4.2 仪器、试剂及材料
• 4.2.1 仪器
• 4.2.2 试剂及材料
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 薄层色谱确定洗脱剂
• 4.3.2 硅胶柱层析
• 4.3.3 高效液相色谱分析
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 薄层色谱确定柱层析洗脱剂
• 4.4.2 硅胶柱层析
• 4.4.3 高效液相色谱分析
• 4.5 本章小结
• 参考文献
• 第五章 金边瑞香乙酸乙酯提取物及其子组分抗氧化与清除自由基活性
• 5.1 引言
• 5.2 仪器、试剂及材料
• 5.2.1 仪器
• 5.2.2 试剂及材料
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 样品的制备
• 5.3.2 总黄酮含量的测定
• 5.3.3 总酚含量的测定
• 5.3.4 清除超氧自由基
• 5.3.5 清除DPPH自由基
• 5.3.6 清除羟基自由基
• 5.3.7 还原铁离子的能力
• 5.3.8 螯合亚铁离子的能力
• 5.3.9 对羟基自由基间接损伤DNA的保护作用
• 5.4 结果与讨论
• 5.4.1 概述
• 5.4.2 总黄酮与总酚含量的测定
• 5.4.3 清除超氧自由基
• 5.4.4 清除DPPH自由基
• 5.4.5 清除羟基自由基
• 5.4.6 还原铁离子的能力
• 5.4.7 螯合亚铁离子的能力
• 5.4.8 对羟基自由基间接损伤DNA的保护作用
• 5.4.9 总黄酮、总酚含量与各活性之间的相关性
• 5.5 本章小结
• 参考文献
• 第六章 F2组分分离纯化及制备
• 6.1 引言
• 6.2 仪器、试剂及材料
• 6.2.1 仪器
• 6.2.2 试剂及材料
• 6.3 实验方法
• 6.3.1 样品准备
• 6.3.2 Sephadex LH-20柱层析分离纯化
• 6.3.3 HPLC分析
• 6.3.4 制备HPLC分离纯化
• 6.4 结果与讨论
• 6.4.1 Sephadex LH-20柱层析分离纯化
• 6.4.2 HPLC分析
• 6.4.3 制备HPLC分离纯化
• 6.5 本章小结
• 参考文献
• 第七章 结论与展望
• 7.1 结论
• 7.2 进一步工作的方向
• 致谢
• 攻读学位期间的研究成果