瑞香素对前脑缺血再灌注大鼠保护作用的实验研究

论文摘要

瑞香素是从长白瑞香中提取出来的有效单体,又名白瑞香素、祖师麻甲素,为香豆素类药物的衍生物,在中枢神经系统中具有镇痛、镇静、抑制血小板聚集等作用,但其对缺血性脑血管病的保护作用机制不十分清楚。生长相关蛋白-43（Grotwh一associatedportein,GAp-43）是一种神经特异性磷酸蛋白质,与神经细胞的生长、轴突的再生和突触重建关系密切。GAP-34在脑缺血再灌注后表达发生变化。为了研究瑞香素在脑缺血再灌注中的保护作用及机制,本实验采用反复夹闭双侧颈总动脉的方法,制备大鼠前脑缺血再灌注模型,应用HE染色、免疫组化、细胞凋亡、免疫印迹和rael-itmePCR等多种方法检测GAP-43蛋白及GAP-43mRNA的表达,从细胞、蛋白及分子水平上探讨瑞香素对脑缺血再灌注后海马神经元保护作用的机制。结果显示:缺血组神经元及胶质细胞部分变性坏死,神经元呈圆形、椭圆形、三角形、长尾状或不规则形,核固缩,随再灌注时间延长,胶质细胞逐渐增生,胞质丰富,嗜伊红色,核小,致密并偏于一侧:瑞香素治疗组神经元坏死损伤较缺血再灌注组轻。瑞香素治疗组较缺血组及假手术组大鼠海马GAP-43蛋白和GAP-43mRNA的表达均增多,差异具有统计学意义。结论:瑞香素能明显减轻脑缺血再灌注导致的海马神经元损伤,具有神经保护作用。瑞香素可能通过上调GAP-43蛋白和GAP-34mRNA的表达,减轻海马神经元的损伤,为其临床治疗缺血性脑血管病提供了实验依据。

论文目录

• 提要
• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第1篇 文献综述
• 第1章 脑缺血再灌注损伤的病理生理机制概述
• 1 兴奋性氨基酸与缺血再灌注损伤
• 2 自由基与缺血再灌注损伤
• 3 钙离子超载与缺血再灌注损伤
• 4 炎症免疫因素与缺血再灌注损伤
• 5 细胞凋亡
• 6 血脑屏障破坏与缺血再灌注损伤
• 第2章 GAP-43蛋白研究现状
• 1 GAP-43的结构及特点
• 2 GAP-43的分布及表达
• 3 GAP-43的生理作用与作用机制
• 4 GAP-43与脑缺血再灌注损伤
• 第3章 瑞香素的药理作用研究概况
• 1 抗炎作用
• 2 对心血管疾病的治疗作用
• 3 镇静作用
• 4 镇痛作用
• 5 对脑血管疾病的治疗作用
• 6 抗缺氧作用
• 7 其他作用
• 第2篇 瑞香素对前脑缺血再灌注大鼠保护作用的实验研究
• 第1章 大鼠前脑缺血再灌注模型的制备
• 1 实验动物
• 2 实验药物
• 3 动物分组
• 4 大鼠前脑缺血再灌注模型制备
• 5 大鼠给药方法及剂量
• 6 大鼠前脑组织标本采集
• 7 石蜡标本制作
• 第2章 瑞香素对大鼠海马缺血性损伤的病理组织学研究
• 1 苏木精-伊红（HE）染色
• 2 免疫组化（SP法）
• 第3章 瑞香素对大鼠海马神经元细胞凋亡的实验研究
• 1 实验仪器
• 2 石蜡组织包埋的预处理
• 3 TUNEL法检测细胞凋亡实验步骤
• 4 细胞凋亡的结果判定及统计学处理
• 5 TUNEL法检测大鼠海马神经元细胞凋亡结果
• 第4章 瑞香素对大鼠海马神经元GAP-43表达的实验研究
• 1 免疫印迹（Western-blot）
• 2 Real-time PCR法检测GAP-43mRNA的表达
• 第5章 讨论
• 1 脑缺血再灌注动物模型
• 2 脑缺血再灌注损伤与GAP-34
• 3 瑞香素对脑缺血再灌注损伤的保护作用
• 4 脑缺血再灌注损伤与细胞凋亡
• 5 特色与创新
• 第6章 结论
• 参考文献
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果
• 致谢