营养水平对妊娠早期母猪和胚胎免疫力的影响

论文摘要

选用日龄和体重相近的63头长白×大白杂交初产母猪,研究营养水平（DE:3.20Mcal/kg;CP:13.10%）对初产母猪妊娠早期血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）含量、子宫和胚胎干扰素-α（interferon-α,IFN-α）、干扰素-β（interferon-β,IFN-β）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、抗病毒蛋白（myxo-virus resistance,Mxl）、Toll样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）mRNA表达及胚胎存活的影响。将配种后的母猪随机分到高、中、低3个营养水平组（采食量水平分别为2.73kg/d、1.64kg/d、0.82kg/d）,每个营养水平组3个重复,每个重复7头猪。在妊娠12天、25天和35天屠宰母猪,分别收集血清、子宫组织和胚胎;采用免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白含量;利用实时荧光定量RT-PCR方法检测目的基因在子宫和胚胎中的表达量。结果表明:1、营养水平显著影响妊娠早期初产母猪血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）含量。血清IgG含量在妊娠12天,中营养水平组极显著高于低营养水平组（P＜0.01）,高营养水平组显著高于低营养水平组（P＜0.05）,到妊娠25、35天,高、中营养水平组极显著高于低营养水平组（P＜0.01）;血清IgA含量在妊娠12天,高、中营养水平组显著高于低营养水平组（P＜0.05）,到妊娠25、35天,高、中营养水平组极显著高于低营养水平组（P＜0.01）;血清IgM含量在妊娠12、25天,高、中营养水平组显著高于低营养水平组（P＜0.05）,到妊娠35天,高、中营养水平组极显著高于低营养水平组（P＜0.01）,高、中营养水平组之间差异不显著（P＞0.05）;2、营养水平显著影响妊娠早期初产母猪子宫和胚胎中免疫相关基因表达,中营养水平组母猪子宫和胚胎IFN-α、IFN-β、IFN-γ、Mxl、TLR4、IL-10基因表达量显著高于低营养水平组（P＜0.05）,但低营养水平组子宫和胚胎TNF-α基因表达量显著高于中营养水平组（P＜0.05）,高、中营养水平组间差异不显著（P＞0.05）;3、营养水平显著影响初产母猪妊娠早期胚胎存活率。妊娠12天,中营养水平组胚胎存活率显著高于高营养水平组（P＜0.05）,中、低营养水平组间差异不显著（P＞0.05）;妊娠25天和35天,中营养水平组胚胎存活率显著高于高、低营养水平组（P＜0.05）,高、低营养水平组间差异不显著（P＞0.05）。结论:1、营养水平显著影响初产母猪妊娠早期的胚胎存活率。在妊娠35天前给母猪饲喂中营养水平（1.2倍维持需要）的饲粮能获得较高的胚胎存活率。而高营养水平饲喂和严重限饲都会导致早期胚胎存活率降低。2、高、中营养水平有利于母体对胚胎的免疫保护。中营养水平有上调子宫和胚胎中免疫相关基因Mxl、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TLR4、IL-10表达量而下调TNF-α表达量的趋势。3、严重限饲显著降低母猪体液免疫水平,并下调子宫和胚胎中免疫相关基因Mxl、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、TLR4、IL-10表达量,从而减弱母猪免疫力及对胚胎的免疫保护作用,不利于胚胎存活。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1 文献综述
• 1.1 营养水平对母猪妊娠早期胚胎存活的影响
• 1.2 母体免疫球蛋白及其对妊娠的影响
• 1.3 IFN-α、IFN-β、IFN-γ、Mxl、TLR4、IL-10、TNF-α及其对妊娠早期胚胎附植和发育的影响
• 1.3.1 Ⅰ型干扰素（IFN-α、IFN-β）
• 1.3.2 干扰素-γ（IFN-γ）
• 1.3.3 抗病毒蛋白（Mxl）
• 1.3.4 Toll样受体4（TLR4）
• 1.3.5 白细胞介素-10（IL-10）
• 1.3.6 肿瘤坏死因子-α（TNF-α）
• 2.本研究的目的、意义
• 3 材料与方法
• 3.1 试验设计
• 3.2 试验动物的选择及分组
• 3.3 试验饲粮
• 3.4 饲养管理
• 3.5 血样收集和屠宰取样
• 3.5.1 血样收集
• 3.5.2 屠宰取样
• 3.6 主要仪器和试剂
• 3.6.1 主要仪器
• 3.6.2 主要试剂
• 3.6.3 常用试剂的配制
• 3.7 测定指标及方法
• 3.7.1 胚胎存活率
• 3.7.2 血清免疫球蛋白浓度测定
• 3.7.3 子宫和胚胎中免疫相关基因测定
• 3.8 数据处理与分析
• 4 结果与分析
• 4.1 营养水平对早期胚胎存活率的影响
• 4.2 营养水平对母猪血清免疫球蛋白浓度的影响
• 4.3 营养水平对子宫和胚胎中免疫相关基因mRNA表达的影响
• 4.3.1 管家基因H2A的Real Time PCR
• 4.3.2 营养水平对子宫和胚胎Mxl基因mRNA表达的影响
• 4.3.3 营养水平对子宫和胚胎IFN-α基因mRNA表达的影响
• 4.3.4 营养水平对子宫和胚胎IFN-β基因mRNA表达的影响
• 4.3.5 营养水平对子宫和胚胎IFN-γ基因mRNA表达的影响
• 4.3.6 营养水平对子宫和胚胎TLR4基因mRNA表达的影响
• 4.3.7 营养水平对子宫和胚胎IL-10基因mRNA表达的影响
• 4.3.8 营养水平对子宫和胚胎TNF-α基因mRNA表达的影响
• 5.讨论
• 5.1 营养水平对妊娠早期初产母猪胚胎存活率的影响
• 5.2 营养水平对母猪血清免疫球蛋白浓度的影响
• 5.3 营养水平对子宫和胚胎中免疫相关基因mRNA表达的影响
• 5.3.1 营养水平对子宫和胚胎中Ⅰ型干扰素（IFN-α、IFN-β）基因mRNA表达的影响
• 5.3.2 营养水平对子宫和胚胎中IFN-γ基因mRNA表达的影响
• 5.3.3 营养水平对子宫和胚胎中Mxl基因mRNA表达的影响
• 5.3.4 营养水平对子宫和胚胎中TLR4基因mRNA表达的影响
• 5.3.5 营养水平对子宫和胚胎中IL-10基因mRNA表达的影响
• 5.3.6 营养水平对子宫和胚胎中TNF-α基因mRNA表达的影响
• 6 结论
• 7 参考文献
• 致谢
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