论文摘要
本实验采用ISR-PCR、16S rDNA ARDRA分类技术对中国农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC）保藏的142株芽孢杆菌进行了多态性研究。ISR-PCR、16S rDNA ARDRA研究结果表明,供试芽孢杆菌间存在明显的遗传多样性。ISR-PCR将128个菌株在77%的相似性水平上分为11个类型,其中相同的参比菌株大都聚在一起,但是大部分的供试菌株和参比菌株分别属于不同的类型,显示供试菌株的ISR序列与参比菌株的ISR序列差异性较大;16S rDNA ARDRA方法显示的是菌株间16S rDNA序列的差异,其结果显示芽孢杆菌间的16S rDNA序列差异较为明显,在50%的相似性水平上将所有菌株分为9个分支,参比菌株中的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）与蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）分别属于3个不同的分支,仅有12个供试菌株没有和参比菌株聚入相同的分支。在对芽孢杆菌多态性研究中发现,胶质芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）的系统发育与典型的芽孢杆菌如枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）有非常明显的异源性。采用表型特征测定、全细胞脂肪酸分析、Rep-PCR指纹图谱技术、ISR-PCR序列分析、16S rDNA ARDRA分析、16S rDNA系统发育分析、DNA D+C mol%、DNA-DNA同源性分析等技术对ACCC保藏的16株硅酸盐细菌及两株参比菌株胶质芽孢杆菌VKPMB-7519T、土壤芽孢杆菌VKPMB-7517T进行遗传多样性研究,以确定其系统发育及分类地位。通过对所有供试硅酸盐菌株的多项生理、生化指标测定发现,供试菌株与参比菌株间有较为丰富的多样性;全细胞脂肪酸分析结果显示,C16:00为供试硅酸盐细菌及参比菌株的特征性脂肪酸,另外C15:0 anteiso的含量也较为丰富,其它类型的脂肪酸成分和含量略有不同;Rep-PCR及16S rDNA系统发育分析研究结果显示供试硅酸盐细菌和土壤芽孢杆菌（Bacillus edaphicus）差异较为明显;ISR-PCR序列分析、16S rDNA ARDRA分析显示所有硅酸性细菌的相似性都非常高,除11005外,其它所有菌株的差异不明显。根据以上实验结果将16株供试硅酸盐细菌分为3组。根据分组情况选取部分供试硅酸盐细菌进行DNA G+C mol%测定,并与胶质芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus VKPMB-7519T）进行DNA同源性测定,结果显示8株供试菌株与胶质芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）属于同一类型,另外8株供试菌株与胶质芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）的DNA同源性小于70%,可能是Bacillus属的新类型。