嗜水气单胞菌亚单位成分卵黄抗体在鳗鲡养殖中应用

论文摘要

嗜水气单胞菌能导致鱼类细菌性疾病,是水产养殖动物主要病原之一。它能够感染各种规格的鳗鲡并引起肠炎、脱粘、败血等病症,严重影响养殖效益甚至引起暴发性死亡。养殖户通常采用抗生素治疗鳗鲡嗜水气单胞菌病,药物频繁使用时常导致鳗鲡产品药物残留、品质下降,不仅影响消费者的健康,也导致进出口贸易技术壁垒等问题。本试验通过制备卵黄抗体,并对其效价和特异性进行测定,结果表明,嗜水气单胞菌嗜水气单胞菌MOMP、ECPs及大肠杆菌菌毛蛋白卵黄抗体在60天内对外膜蛋白抗原的抗体效价均达到1:10280以上,抗体效价较高,可以用来作为抗体,同时所制备的卵黄抗体特异性强。动物试验结果表明,嗜水气单胞菌多价卵黄抗体投喂的昆明鼠攻毒存活率为72.7%,未投喂卵黄抗体的昆明鼠存攻毒活率仅27.3%:经过卵黄抗体投喂的鳗鲡攻毒存活率为77.8%,未投喂卵黄抗体的鳗鲡攻毒存活率仅44.4%。卵黄抗体经饲料添加方式投喂动物,能够增强小鼠和鳗鲡抵抗嗜水气单胞菌的侵染能力。田间批量实验结果表明,在欧洲鳗鲡饲料中长期添加3g-10g卵黄液/kg饲料的嗜水气单胞菌亚单位成分卵黄抗体可以提高饲料转化率2.5-3.1%,在试验的3个鳗场中,尤溪的田间试验鳗鲡的成活率与对照相比不明显,福清的两个场鳗鲡的成活率较对照有所提高,试验数据结果表明福清的两个鳗鲡场对照组的平均死亡率是实验组的1.58倍和1.64倍。喂食卵黄抗体可以提高鳗鲡的成活率。综上所述,嗜水气单胞菌多价卵黄抗体具有中和嗜水气单胞菌毒力的作用和提高鳗鲡饲料转化率的效果,为开发鳗鲡新型无公害防病添加剂提供一种新的方法,为完善卵黄抗体应用研究提供了具有重要参考价值的科学数据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 前言
• 1.研究目的与意义
• 2.国内外研究进展
• 2.1 嗜水气单胞菌
• 2.1.1 外毒素
• 2.1.2 菌毛
• 2.1.3 外膜蛋白
• 2.1.4 胞外蛋白酶
• 2.2 卵黄抗体
• 2.2.1 卵黄抗体的形成
• 2.2.2 卵黄抗体的基本理化性质
• 2.2.3 卵黄抗体的特点
• 2.2.4 卵黄抗体的应用
• 2.3 嗜水气单胞菌卵黄抗体作用机理
• 第二部分 嗜水气单胞菌卵黄抗体的制备及效价测定
• 1 材料与方法
• 1.1 菌株来源
• 1.2 嗜水气单胞菌主要保护性抗原ECPs、MOMP的制备
• 1.3 主要保护性抗原ISCOMs的制备及电镜观察
• 1.4 主要保护性抗原ISCOMs对蛋鸡的免疫程序:
• 1.5 卵黄抗体的制备:
• 1.6 卵黄抗体ELISA效价测定:
• 1.7 SDS-PAGE及Western-blot
• 1.8 免疫攻毒保护试验
• 2 结果与分析
• 2.1 MOMP和ECP的提取
• 2.2 嗜水气单胞菌MOMP、ECP—ISCOMs的制备
• 2.3 嗜水气单胞菌主要保护性抗原卵黄抗体的效价测定及特异性分析
• 2.4 卵黄抗体对的动物的保护能力
• 3.小结与讨论
• 第三部分 嗜水气单胞菌卵黄抗体对鳗鲡的影响
• 1.材料和方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 步骤和方法
• 2 结果与分析
• 2.1 田间试验效果
• 3.小结与讨论
• 3.1 在鳗鲡饲料中添加卵黄抗体对鳗鲡饲料转化率的影响
• 3.2 在鳗鲡饲料中添加卵黄抗体对鳗鲡死亡率的影响
• 3.3 在鳗鲡饲料中添加卵黄抗体对鳗鲡规格提高比率的影响
• 第四部分 总结和讨论
• 4.1 所制备的卵黄抗体效价高，特异性强
• 4.2 卵黄抗体对的动物的具有明显的保护能力
• 4.3 卵黄抗体具有广阔的应用前景
• 4.5 卵黄抗体可以提高饲料的转化率
• 4.7 在鳗鲡饲料中添加卵黄抗体可以减少鳗鲡的死亡率
• 4.8 在鳗鲡饲料中添加卵黄抗体可以提高鳗鲡的规格
• 4.9 存在的问题和后续研究的方向
• 参考文献
• 致谢