论文摘要
目的:1.观察复元胶囊（简称FYC）对实验性膝骨关节炎（KOA）组织学形态及软骨基质的影响,探讨其对软骨的保护作用。2.观察FYC对实验性KOA炎症介质NO、iNOS及PGE2的影响,探讨其在骨关节炎中的抗炎作用。方法:60只SD雄性大鼠,随机平均分成6组:正常组、模型组、四环素组及FYC低、中、高剂量组。采用改良Hulth法建立骨关节炎模型。造模后第2周开始,每天予药物干预:FYC低、中、高剂量组分别给复元胶囊371.65 mg·kg-1·d-1、743.30 mg·kg-1·d-1及2229.90 mg·kg-1·d-1灌胃;四环素组予四环素50 mg·kg-1·d-1灌胃。给药12周后,腹主动脉取血,切取右膝股骨内侧髁。肉眼、HE染色观察软骨的组织形态并评分,采用甲苯胺蓝及Masson特殊染色检测软骨蛋白多糖及胶原含量,免疫组化检测Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原及iNOS表达,分别采用硝酸基还原酶法及酶联免疫吸附法分别测定血清NO、PGE2含量。结果:1.FYC对KOA关节软骨组织形态的影响正常组软骨肉眼观察呈淡蓝色,软骨表面光滑;模型组软骨颜色变暗,表面不光滑,有小溃疡形成;FYC各组软骨较模型组光滑。光镜下正常组软骨细胞排列整齐,基质染色均匀;模型组软骨细胞排列极为紊乱,细胞数目减少;FYC各组较模型组软骨细胞增多,排列整齐。大体评分及Mankin’s评分均显示:模型组较正常组高（P<0.05）,FYC各组较模型组低（P<0.05）。2.FYC对KOA关节软骨基质的影响（1）蛋白多糖及胶原含量:正常组甲苯胺蓝及Masson软骨染色均匀,模型组染色极度不均, FYC各组软骨染色较模型组多而均匀。模型组软骨蛋白多糖及胶原显著低于正常组（P<0.01）,FYC各组较模型组高（P<0.05）。（2）Ⅱ型胶原及Ⅰ型胶原表达:正常组全层软骨可见Ⅱ型胶原表达,Ⅰ型胶原未见表达;模型组Ⅱ型胶原显著低于正常组（P<0.01）,而Ⅰ型胶原显著高于正常组（P<0.01）;FYC各组Ⅱ型胶较模型组多（P<0.05）,Ⅰ型胶原较模型组低（P<0.05）。3.FYC对KOA关节软骨iNOS及血清NO、PGE2的影响（1）iNOS表达:正常关节软骨仅少数几例标本见iNOS散在少量表达。模型组全层软骨细胞均见iNOS表达,显著多于正常组（P<0.01）;FYC各组软骨iNOS表达均低于模型组（P<0.05）。（2）NO含量:模型组显著高于正常组（P<0.01）;FYC各组均低于模型组（P<0.05）。（3）PGE2含量:模型组显著高于正常组（P<0.01）;FYC各组显著低于模型组（P<0.01）。结论:1.改良Hulth法造模12周后即可见OA典型病理表现,表明实验性KOA模型复制成功。FYC能减轻KOA关节软骨病理损伤,表明其对关节软骨具有一定保护作用。2.FYC能增加大鼠KOA关节软骨基质中蛋白多糖及胶原的表达,尤其是增加Ⅱ型胶原表达,降低Ⅰ型胶原表达,表明FYC对维持正常胶原表型,保护正常软骨基质具有一定的作用。3.FYC能降低OA关节软骨中iNOS表达及血清中NO、PGE2含量,对减轻关节炎有一定的作用。