体外培养细胞间纳米管通道及其生物学意义的研究

体外培养细胞间纳米管通道及其生物学意义的研究

论文摘要

目的对于多细胞生物,信息的传递和细胞间的相互作用是必不可少和多种多样的。纳米管通道(tunneling nanotubule,TNT)是新近发现的一种细胞间通讯方式,其直径50-200nm,在大小上类似于胞间桥(intercellular bridge,IB),允许细胞器转移。本实验探讨体外培养的肿瘤细胞及正常细胞的TNTs的特性,从而了解TNTs在肿瘤发生、发展中的作用。方法倒置相差显微镜观察人肝癌细胞系HepG2细胞间和人肝细胞系ChangLiver细胞间TNTs的结构特点及培养过程中数目的变化;再用亲脂性的荧光染料标记HepG2细胞或ChangLiver细胞,在荧光显微镜下分析膜性小泡经TNTs的运输过程;使用两种荧光染料分别标记HepG2细胞和人肝细胞系ChangLiver细胞,共培养后利用共聚焦显微镜观察两种细胞间能否建立经TNTs的细胞间通讯方式。结果Hep G2细胞问存在TNTs及Chang Liver细胞间有TNTs,随着培养时间的增长TNTs的数目增加;膜性小泡能够沿TNTs进行单向、阶段性的运输;Hep G2细胞和Chang Liver细胞之间能发现TNTs,并由Chang Liver细胞发出,来自Chang Liver细胞的膜泡沿TNTs运输至HepG2细胞中。结论纳米管通道是体外培养细胞间普遍存在的通讯方式之一,膜性小泡能够沿其在细胞间单向转运。来自肝细胞系ChangLiver的纳米管通道连接肝癌细胞系HepG2,并转运前者的膜性小泡进入癌细胞中。

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