川芎嗪对人视网膜色素上皮细胞表达低氧诱导因子-1α及VEGF的影响

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目的：1、探讨川芎嗪对离体培养的人视网膜色素上皮细胞（RPE细胞）增殖的影响。2、探讨糖基化终产物（AGEs）作用下人RPE细胞中核转录因子低氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达的改变及相关细胞因子血管内皮生长因子（VEGF）mRNA及蛋白表达的改变。3、探讨加入川芎嗪后对AGEs作用下人RPE细胞中HIF-1α蛋白表达、VEGF mRNA及蛋白表达改变的影响，探讨川芎嗪治疗糖尿病视网膜病变（DR）的分子机制，为川芎嗪治疗DR提供实验依据。方法：1、应用酶消化法分离人RPE细胞，进行形态学观察，并运用免疫细胞化学法做抗人角蛋白抗体鉴定，取3-8代细胞用于实验。2、细胞计数法、四唑盐（MTT）比色法检测不同浓度（0、10、20、40、80、160、320、640mg／L）和处理时间（24和48h）下川芎嗪对RPE细胞增殖活性的影响，并计算出相应的细胞增殖抑制率。3、免疫细胞化学方法及免疫印迹法（Western Blot）观察相同时间不同浓度AGEs作用下、相同AGEs浓度不同作用时间组RPE细胞中HIF-1α蛋白表达的改变。4、逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）观察相同时间不同AGEs浓度作用组、相同AGEs浓度不同作用时间组RPE细胞中VEGF mRNA表达的改变。5、免疫细胞化学方法及免疫印迹法（Western Blot）观察相同时间不同AGEs浓度作用组、相同AGEs浓度不同作用时间组RPE细胞中VEGF蛋白表达的改变。6、观察加

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前言

第一章川芎嗪对人视网膜色素上皮细胞增殖活性的影响

1.1 材料与方法

1.2 结果

1.3 讨论

1.4 小结

第二章糖基化终产物作用下对人视网膜色素上皮细胞HIF-1α蛋白、VEGFmRNA、VEGF蛋白表达的影响

2.1 材料与方法

2.2 结果

2.3 讨论

2.4 小结

第三章川芎嗪对糖基化终产物作用下的人视网膜色素上皮细胞表达HIF-1α蛋白、VEGF mRNA及蛋白的影响

3.1 材料与方法

3.2 结果

3.3 讨论

3.4 小结

总结

参考文献

附图

综述

致谢

攻读学位期间主要研究成果

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