“肺病及肠”病理变化及相关调控物质和ERK信号通路研究

论文摘要

目的：观察肺病（过敏性哮喘）模型大鼠对大肠的影响,探讨“肺病及肠”的病理变化及相关调控物质和ERK信号通路。方法：选用雄性Wistar大鼠,设空白组,肺病（过敏性哮喘）组共2组。除空白组外,肺病组采用腹部4点注射用1%卵白蛋白、氢氧化铝、生理盐水配制成的凝胶致敏剂,注射后超声雾化吸入1%OVA诱发哮喘。雾化一周后检测动物肺功能；收集支气管肺泡灌洗液及粪便检测肺肠微生态；采集动物股动脉血液检测血常规和TNF-α、IL-1含量；光镜观察肺、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠组织病理变化；电镜观察肺和结肠组织；免疫组化法检测肺、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠组织中CCK8、CGRP、SP、VIP含量；RT-PCR法检测肺、结肠组织iNOS、ERKmRNA表达。结果：1.病理生理肺功能：肺病组大鼠的呼吸频率明显增快,潮气量、每分钟通气量明显降低,与空白组比较有显著性差异（P<0.01）；粪便性状、质地、干湿重量观察：肺病组大鼠大便次数减少,排便较空白组困难,粪便的外观变小,质地干硬,粒数减少、干湿重量均减轻（P<0.05）；胃排空与肠推进试验：与空白组比较,肺病组大鼠胃内残留率升高（P<0.05）,大肠炭末推进率降低（P<0.05）；肺肠微生态：肺病组的肺部需氧菌、真菌明显增多,厌氧菌显著减少（P）<0.01)；肠道需氧菌、真菌、大肠杆菌较空白组显著增多（P<0.01）,厌氧菌、类杆菌和双歧杆菌显著减少（P<0.01）；2.病理形态光镜、电镜观察：光镜观察结果显示造模前后大鼠肺和结肠组织出现一定程度的病理改变,而十二指肠、空肠、回肠、直肠、胃组织无明显变化；电镜观察结果显示肺和结肠组织出现一定程度的病理改变。3.相关调控物质CCK8、CGRP、SP、VIP含量变化：肺病组肺组织CCK8含量减少、CGRP含量增多、SP含量增多、VIP含量减少,与空白组比较有统计学差异（P<0.01）；结肠组织CCK8含量增多、CGRP含量增多、SP含量减少、VIP含量增多,与空白组比较有统计学差异（P<0.01或P<0.05）；两组的十二指肠、空肠、回肠、直肠、胃等组织中CCK8、CGRP、SP、CIP的含量变化比较无统计学差异（P>0.05）TNF-α、IL-1:肺病组血清TNF-α、IL-1明显升高,与空白组比较有显著性差异（P<0.01）；iNOSmRNA表达：肺病组大鼠的肺组织、结肠组织iNOS mRNA表达升高,与空白组比较有显著性差异（P<0.01）。ERKmRNA表达：肺病组大鼠的肺、结肠组织ERKmRNA表达升高,与空白组比较有差异（P＜0.01或P<0.05）。结论：1.肺在一定的病理状态下可以影响及大肠,出现大肠的病理变化。2.肺在一定的病理状态下可以影响及大肠,出现大肠的相关调控物质变化。3.肺在一定的病理状态下可以影响及大肠,出现大肠的ERKmRNA表达的变化。4. CCK8、CGRP、SP、VIP、TNF-α、IL-1、iNOS可能是“肺病及肠”的物质基础。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略词对照表
• 前言
• 第一部分:大鼠肺病（过敏性哮喘）模型的建立和评价
• 1 实验材料和方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 药物及试剂
• 1.3 实验仪器及设备
• 1.4 实验用品
• 1.5 肺病（过敏性哮喘）模型的制备
• 1.6 肺功能观察方法
• 1.7 肺部微生态检测方法
• 1.8 血常规检测方法
• 1.9 血清TNF-A、IL-1含量检测方法
• 1.10 肺组织病理学改变观察方法
• 1.11 肺组织CCK8、CGRP、SP、VIP含量检测方法
• 1.12 肺组织超微结构观察方法
• 1.13 数据分析与统计方法
• 2 结果
• 2.1 肺功能观察结果
• 2.2 肺部微生态检测结果
• 2.3 血常规检测结果
• 2.4 血清TNF-A、IL-1含量检测结果
• 2.5 肺组织病理形态光镜观察结果
• 2.6 肺组织CCK8、CGRP、SP、VIP含量变化结果
• 2.6.1 肺组织CCK8含量检测结果
• 2.6.2 肺组织CGRP含量检测结果
• 2.6.3 肺组织VIP含量检测结果
• 2.6.4 肺组织SP含量检测结果
• 2.7 肺组织病理形态电镜观察结果
• 3 讨论
• 3.1 关于模型实验动物的选择
• 3.2 关于模型实验药物的选择
• 3.3 关于模型药物注射部位及雾化时长的探讨
• 第二部分:"肺病及肠"的病理变化及微生态学研究
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 药物与试剂
• 1.3 实验仪器及设备
• 1.4 实验用品
• 1.5 肺病（过敏性哮喘）模型的制备
• 1.6 肺功能观察方法
• 1.7 粪便质地性状、粪便干湿重观察方法
• 1.8 胃肠功能检测方法
• 1.8.1 胃排空试验方法
• 1.8.2 肠推进试验方法
• 1.9 肺肠微生态检测方法
• 1.9.1 肺部微生态收集标本方法
• 1.9.2 肠道微生态收集标本方法
• 1.10 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织病理形态光镜观察方法
• 1.11 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织SP、VIP含量检测方法
• 1.12 肺、结肠病理形态电镜观察方法
• 1.13 数据分析与统计方法
• 2 结果
• 2.1 肺功能检测结果
• 2.2 粪便性状、质地、干湿重观察结果
• 2.3 胃排空与肠推进试验结果
• 2.3.1 胃排空试验结果
• 2.3.2 肠推进试验结果
• 2.4 肺、肠微生态学检测结果
• 2.4.1 肺部微生态检测结果
• 2.4.2 肠道微生态检测结果
• 2.5 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织病理形态光镜观察结果
• 2.6 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织SP、VIP含量检测结果
• 2.6.1 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织SP含量变化结果
• 2.6.2 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织VIP含量检测结果
• 2.7 肺、结肠病理形态电镜观察结果
• 2.7.1 肺组织电镜观察结果
• 2.7.2 结肠组织电镜观察结果
• 3 讨论
• 3.1 关于"肺病及肠"相关病理变化的探讨
• 3.1.1 关于中医对于"肺"的认识
• 3.1.2 中医文献对"大肠"解剖定位的比较
• 3.1.3 中医对"肺病及肠"的认识
• 3.1.4 关于肺病影响及哪一脏腑的探讨
• 3.1.5 关于"肺病及肠"理论中的"大肠"部位的探讨
• 3.1.6 关于结肠特异性的探讨
• 3.2 关于微生态与"肺"及"大肠"关系的探讨
• 3.2.1 关于人体微生态的探讨
• 3.2.2 关于"肺病及肠"的微生态研究结果探讨
• 第三部分:"肺病及肠"的相关调控物质和ERK信号通路研究
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 药物与试剂
• 1.3 实验仪器与器材
• 1.4 肺病（过敏性哮喘）模型的制备
• 1.5 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织CCK8、CGRP、SP、VIP含量检测方法
• 1.6 血清TNF-A、IL-1含量检测方法
• 1.7 肺、结肠组织一氧化氮合酶MRNA和ERK MRNA表达检测方法
• 1.8 数据分析与统计方法
• 2 结果
• 2.1 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织CCK8含量检测结果
• 2.2 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织CGRP含量检测结果
• 2.3 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织SP含量检测结果
• 2.4 肺、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠、胃组织VIP含量检测结果
• 2.5 血清TNF-A、IL-1含量检测结果
• 2.6 肺和结肠组织中一氧化氮合酶-MRNA表达结果
• 2.7 肺和结肠组织ERK-MRNA表达结果
• 3 讨论
• 3.1 关于"肺病及肠"相关调控物质的探讨
• 3.1.1 关于P物质与"肺"、"大肠"的关系
• 3.1.2 关于血管活性肠肽与"肺"、"大肠"的关系
• 3.1.3 关于胆囊收缩素八肽与"肺"、"大肠"的关系
• 3.1.4 关于降钙素相关基因肽与"肺"、"大肠"的关系
• 3.1.5 关于肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1与"肺"、"大肠"的关系
• 3.1.6 关于一氧化氮合酶与"肺"、"大肠"的关系
• 3.2 关于ERK信号通路与"肺"、"大肠"的关系
• 结论
• 问题与展望
• 参考文献
• 致谢
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
• 附录
• 1 附图
• 2 综述
• 参考文献