论文摘要
染色体是生物遗传的物质载体，在生物的世代相传过程中表现出高度的稳定性和物种特异性。通过染色体分析，可为研究物种的起源进化、品种的形成和基因的定位提供细胞遗传学方面的基本资料。本实验以昆明小鼠4、8-细胞期胚胎单卵裂球为研究对象，以CZB培养液为基础培养液，采用空气干燥法制备单卵裂球的染色体标本。实验中分别添加不同浓度的两种纺锤体阻断剂——秋水仙素和长春花碱进行不同阻断培养时间的实验以确定阻断剂的最佳处理浓度和时间，并以不同低渗液对胚胎进行低渗处理以确定最佳的低渗液种类，从而获得了理想的实验参数，进一步对得到的中期分裂相进行了分级评定。实验结果如下：1、在确定秋水仙素不同处理浓度和时间对小鼠4-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养2小时组中0.6μg／ml浓度组与其他三组差异显著（0.2μg／ml组、0.4μg／ml组和0.8μg／ml组）；阻断培养4小时组中0.4μg／ml浓度组与其他三组差异显著；阻断培养6小时组中0.6μg／ml浓度组与其他三组差异显著；阻断培养8小时组中0.4μg／ml浓度组与其他三组差异显著（P＜0.05）。根据实验的实际情况，适宜制备小鼠4-细胞期胚胎单卵裂球染色体标本的秋水仙素的处理浓度和时间是0.6μg／ml和6小时。2、在确定秋水仙素不同处理浓度和时间对小鼠8-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养2小时组中四个浓度组差异均不显著；阻断培养4小时组中0.2μg／ml浓度组与其他三组差异显著；阻断培养6小时组中四个浓度组差异均不显著；阻断培养8小时组中0.4μg／ml浓度组与其他三组差异显著（P＜0.05）。根据实验的实际情况，适宜制备小鼠8-细胞期胚胎单卵裂球染色体标本的秋水仙素的处理浓度和时间是0.2μg／ml和6小时。3、在确定长春花碱不同处理浓度和时间对小鼠4-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养0.1μg／ml浓度组中10小时组与其他三组差异显著（4小时组、6小时组和8小时组）；阻断培养0.3μg／ml浓度组中8小时组和10小时组间差异不显著，但与其他两组差异显著；阻断培养0.5μg／ml浓度组中10小时组与6小时组差异不显著，而与其他两组差异显著；阻断培养0.7μg／ml浓度组中8小时组与其他三组差异显著（P＜0.05）。根据实验的实际情况，适宜制备小鼠4-细胞期胚胎单卵裂球染色体标本的长春花碱的处理浓度和时间是0.1μg／ml和8小时。4、在确定长春花碱不同处理浓度和时间对小鼠8-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，阻断培养0.1μg／ml浓度组中10小时组与其他三组差异显著；阻断培养0.3μg／ml浓度组中8小时组和10小时组间差异不显著，但与其他两组差异显著；阻断培养0.5μg／ml浓度组中10小时组与其他三组差异显著；阻断培养0.7μg／ml浓度组中10小时组与其他三组差异显著（P＜0.05）。根据实验的实际情况，适宜制备小鼠8-细胞期胚胎单卵裂球染色体标本的长春花碱的处理浓度和时间是0.1μg／ml和10小时。5、在确定不同种类低渗液处理对小鼠4、8-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数影响的实验中，经统计分析，0.45％氯化钠低渗液组与其他两组（0.5％柠檬酸钠和0.35％氯化钾）差异显著（P＜0.05）。低渗液选用0.45％氯化钠时，低渗效果优于选用0.5％柠檬酸钠和0.35％氯化钾的。6、在利用最佳参数制备小鼠4-细胞期胚胎单卵裂球染色体标本时，经统计分析，两种阻断剂的作用效果差异不显著；而在制备小鼠8-细胞期胚胎单卵裂球染色体时阻断剂选用长春花碱的效果优于秋水仙素的（P＜0.05）。7、秋水仙素组和长春花碱组小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球染色体标本制备质量分别为：2.5、2.7、2.4、1.9。