芹菜素对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡的保护作用

论文摘要

目的:探讨黄酮类化合物芹菜素对大鼠实验性心肌缺血再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）时心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响,并分析其对心肌损伤的保护作用。方法:采用结扎左冠状动脉前降支,心肌缺血45 min,再灌注2 h制作缺血再灌注模型。将大鼠随机分为八组,即正常组（the normal group, Normal）、假手术组（sham operation group, Sham）、生理盐水缺血再灌注组（physiological saline ischemia-reperfusion group, NS）、溶剂对照组（solvent control group, Sol）、美托洛尔对照组（metoprolol control group, Meto）、芹菜素低、中、高剂量（1 mg·kg-1、2 mg·kg-1、4 mg·kg-1）用药组（apigenin low, medium and high dose treatment group, Api1、Api2、Api4）。同时观察大鼠再灌注心律失常持续时间和再灌注心律失常评分。再灌注2 h后,采用化学法测定一氧化氮（nitric oxide,NO）含量,用721分光光度计测定一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, NOS）活力;用1%Evean Blue和2,3,5-三苯基氯化四氮（2,3,5–tri phenyltetrazolium chloride, TTC）染色法测定心肌损伤面积和梗死面积;采用TUNEL法检测原位标记凋亡心肌细胞;免疫组化法测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;病理组织切片检查心肌损伤情况;采用RT-PCR法测Bcl-2和Bax基因的mRNA表达。结果:⑴芹菜素各剂量组血清样品中NO含量均显著高于NS组（P<0.05）,其中,Api4组的NO含量最高。⑵芹菜素各剂量组的心肌组织样品中总NOS活力和cNOS活力显著高于NS组（P <0.05）,其中Api4组的总NOS活力和cNOS活力最高。iNOS活力在各组之间没有差异,且iNOS活力比cNOS活力低的多。⑶芹菜素各剂量组与NS组比较,剂量依赖性地缩小大鼠缺血再灌注心肌梗死面积（P <0.05）。⑷Api4组和Meto组降低心律失常评分和缩短心律失常出现总持续时间,与NS组和Sol组比较均有统计学意义（P <0.05）;NS组和Sol组比较无统计学意义（P>0.05）;Api4组和Meto组比较无统计学意义（P>0.05）。⑸芹菜素各剂量组心肌细胞凋亡率明显低于NS组（P <0.05）;APi1、APi2、APi4能剂量依赖性地降低大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡率（P <0.05）。⑹芹菜素各剂量组剂量依赖性地提高大鼠心肌缺血再灌注Bcl-2蛋白表达量（P <0.05）、降低大鼠心肌缺血再灌注Bax和Caspase-3蛋白表达量（P <0.05）。⑺芹菜素各剂量组与NS组比较,心肌组织损伤的病理学变化显著减轻（P <0.05）。⑻芹菜素各剂量组与NS组比较（P <0.05）,Bcl-2 mRNA表达量增加和Bax mRNA表达量减少均呈剂量依赖性。结论:⑴芹菜素药物预适应对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能与其影响NO产生有关。⑵芹菜素具有缩短大鼠再灌注心律失常持续时间,降低再灌注心律失常评分和细胞凋亡率,缩小大鼠缺血再灌注心肌梗死面积,进一步证明其对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。⑶芹菜素抗大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡机制可能与其下调心肌Bax、Caspase-3和上调Bcl-2的表达有关。

论文目录

• 主要符号表
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 芹菜素对大鼠心肌缺血再灌注NO水平、NOS水平、心肌梗死面积及心律失常的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 第二部分 芹菜素对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡及相关蛋白 Bcl-2、Bax 和 Caspase-3 表达的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 第三部分 芹菜素对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax的mRNA表达的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 个人简介
• 致谢