虫草素降低HepG2细胞内甘油三酯的机制探讨

虫草素降低HepG2细胞内甘油三酯的机制探讨

论文摘要

目的本文主要就虫草素(Cordycepin)降低HepG2细胞内的甘油三酯(Triglyceride)的分子作用机制做初步探讨。方法通过分子对接(AutoDocK4.0软件)方法对虫草素与受体蛋白质的结合进行模拟并用质谱分析虫草素与AMPK(AMP activated protein Kinase)的结合情况,用MTT法检测虫草素的细胞毒性,并用甘油三酯试剂盒测定虫草素对细胞内甘油三酯含量的影响,用ATP easylite-kinase试剂盒观察虫草素对AMPK酶活性的变化并在蛋白水平检测虫草素与HepG2细胞作用后PPAR表达情况,以及用HPLC检测虫草素与HepG2细胞作用后虫草素代谢情况。结果分子对接实验以及质谱分析表明虫草素与AMPK能够很好地结合,不同浓度的虫草素与HepG2细胞作用一定的时间后细胞存活率明显增加而与HepG2细胞作用后,细胞内的甘油三酯明显降低,在蛋白水平PPAR表达明显,但HPLC检测虫草素在细胞内98%的代谢在2小时以内。结论虫草素有明显的降低HepG2细胞内的甘油三酯作用,可能是通过激活AMPK从而诱导其下游的PPAR表达而达到降低血脂的目的;值得我们注意的是虫草素在细胞内代谢如此快,但将血脂又是相对持久很有可能是它在体内转化成其他代谢物而起作用的,有待于我们继续探讨。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 缩略词表
  • 引言
  • 第一章 材料
  • 1.1 细胞
  • 1.2 试剂
  • 1.3 仪器
  • 第二章 方法
  • 2.1 细胞培养与处理
  • 2.2 AMPK与虫草素的结合
  • 2.3 细胞活力
  • 2.4 细胞内甘油三酯的测定
  • 2.5 AMPK活性的测定
  • 2.6 Western Blotting检测PPARa/γ表达情况
  • 2.7 用HPLC分析虫草素代谢情况
  • 2.8 统计学分析
  • 第三章 结果
  • 3.1 AMPK与虫草素的结合
  • 2细胞增殖的影响'>3.2 MTT检测法观察虫草素对人HepG2细胞增殖的影响
  • 3.3 细胞内甘油三酯含量的测定
  • 3.4 虫草素对AMPK的活性影响
  • 3.5 PPARa/γ表达情况
  • 3.6 HPLC分析虫草素的代谢
  • 第四章 讨论
  • 第五章 结论
  • 第六章 参考文献
  • 致谢
  • 综述
  • 附录 论文发表情况
  • 相关论文文献

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