论文摘要
本博士研究论文内容是结合指导教授的研究领域及方向，在大量国内外文献研究和本实验室前期研究成果的基础上，针对目前大肠癌疾病的临床统计现状而设计完成的。据最新世界卫生组织研究统计报道，大肠癌疾病死亡率是居第3位的恶性肿瘤，在全世界每年造成约655000人死亡。且在中国发病率呈增高趋势，已经成为最常见的恶性疾病之一。虽然目前对大肠癌的信号传导通路因子已有了深入的研究，但仍不尽完善，主要的方法还是外科手术及放化治疗，而安全性高疗效确切的治疗药物还很少见。在众多相关报道的治疗通路靶向因子的机制中，基质金属蛋白酶表达生物途径正在引起同行学术界的广泛认同和极大重视。在基质金属蛋白酶系28种蛋白酶中，与本项研究相关的金属蛋白酶主要有两种，包括基质金属蛋白酶MMP-2，9。 MMPs的主要作用包括参与细胞外基质降解等一系列的生理过程，如参与胚胎发育，繁殖，血管生成和组织重构等，并且参与其他一些疾病发生发展过程，例如参与关节炎、肿瘤的侵袭和转移等过程。最近几年中，关于基质金属蛋白酶家族过度表达的研究，作为肿瘤的生物标志物及癌症的不良预后标志，已经进行了一系列的深入研究，其中大肠癌为其研究热点之一。例如MMPs基因编码的酶，其可以降解细胞基底膜的主要结构成分—IV型胶原蛋白，从而在促进肿瘤细胞侵袭和转移过程中起起重要作用。相关研究已经在一些肿瘤中检测到基质金属蛋白酶的过表达，如大肠癌、膀胱癌、肺癌、前列腺癌、胃癌及卵巢癌等。前期本研究室对基质金属蛋白酶与大肠癌细胞中的表达相关性研究结果表明，和正常大肠组织相比，基质金属蛋白酶2蛋白在大肠癌组织中的表达量明显升高。并且，MMP-2在大肠癌组织中的表达量、肿瘤的大小、淋巴结转移数、远处转移、肿瘤Dukes’分期、肿瘤的侵袭度均呈正相关性。基质金属蛋白酶的表达较高的患者的整体生存期明显短于基质金属蛋白酶表达低患者。多元分析结果表明，基质金属蛋白酶的表达水平是一个衡量大肠癌患者的生存及预后的独立指标。本实验显示，实验组通过抑制大肠癌细胞MMPs的表达，大肠癌细胞增殖，集落形成及肿瘤细胞生长的侵袭性均受到明显抑制。因此，在本项课题研究中，我们采用天然产生的褐藻为研究对象，对其化学成分进行了研究，分离纯化了具有生物活性的聚合酚类化合物，并经过核磁共振光谱（NMR）解析技术，对其化学结构进行了鉴定研究。同时与文献进行了比较研究，确证其为褐藻聚合酚类化合物，即Phlorofucofuroeckol A （PFFE－A）。我们研究了该化合物对基质金属蛋白酶的表达作用的研究。结果表明，该化合物具有明显的抑制大肠癌细胞中MMPs过度表达的活性，抑制MMPs-2,9的表达尤为明显。该项研究的实验结果为进一步寻找药物途径治疗大肠癌疾病，提供了详实的科学实验依据。