论文摘要
氧乐果是目前我国广泛应用于农业生产中防治病虫害的有机磷农药。然而由于氧乐果用量大、毒性强，造成了环境污染，影响了生态平衡并危害人类健康。因此研究氧乐果污染的治理具有重要的意义。微生物降解具有操作简单，成本低于物理化学方法，效果好，对污染物氧化比较完全等优点，成为降解有机磷农药的重要途径。本研究从农药厂废水处理站的活性污泥和受氧乐果污染的土壤中，通过富集培养、分离和纯化，获得了18株具有氧乐果降解能力的菌株，其中细菌12株，真菌6株。通过氧乐果降解率的测定，筛选出具有较强降解能力的真菌菌株YF-3和细菌菌株YB-10。菌株YF-3能以氧乐果为唯一碳源和能源生长，菌株YB-10不能以氧乐果为唯一碳源和能源生长，通过共代谢方式降解氧乐果，5d降解率分别为68．34％和73．81％。经鉴定，菌株YF-3归类为曲霉属，菌株YB-10归类为芽孢杆菌属。探讨了氧乐果初始浓度(200 mg·L-1-5000 mg·L-1)和葡萄糖浓度(200mg·L-1-10000 mg·L-1)对降解菌生长的影响。结果表明，菌株YF-3最适生长的氧乐果初始浓度为1000 mg·L-1，低于1000 mg·L-1，随着提供碳源的氧乐果浓度的增大，生长量增加，而高浓度时，抑制菌体的生长。菌株YB-10生长停滞期随氧乐果浓度的增大而延长，氧乐果相对低浓度(200 mg·L-1-1000 mg·L-1)时，随着浓度增大，对菌株YB-10的生长影响不大，菌体的生长趋于稳定，高浓度时毒性增大，抑制菌体的生长。菌株YF-3和菌株YB-10的生长量随葡萄糖浓度的增加而增大。研究了温度、pH值、装液量对降解菌生长的影响。结果表明，菌株YF-3在含氧乐果1000 mg·L-1的培养基中，最适生长条件为温度35℃，pH 6．5，250 mL三角瓶装液量100 mL，最佳条件下，72h菌体干重最大为3．984 mg·L-1。菌株YB-10在葡萄糖1500 mg·L-1、氧乐果1000 mg·L-1的培养基中，最适生长条件为温度30℃，pH 7．0，250 mL三角瓶装液量100 mL，最佳条件下，36h菌体OD600值最大为1．097。研究了氧乐果初始浓度(200 mg·L-1-5000 mg·L-1)、葡萄糖浓度(200 mg·L-1-10000mg·L-1)、温度、pH值、装液量对菌株YF-3降解氧乐果的影响。结果表明，随着氧乐果浓度的增大，降解率减小。添加低浓度的葡萄糖，能促进菌株YF-3对氧乐果的降解。最适降解条件为pH 7．0、温度35℃、250 mL三角瓶装液量100 mL。在最佳降解条件下，5d氧乐果由1000 mg·L-1降到297 mg·L-1，降解率达到70．34％，添加300 mg·L-1的葡萄糖，能促进菌株YF-3对氧乐果的降解，降解率提高到72．16％。对菌株YB-10培养基的碳源、氮源、磷源种类和浓度进行了单因素试验研究。结果表明，培养基的最适碳源、氮源、磷源分别为葡萄糖、NH4N03、KH2P04。在各自一定的浓度范围内，氧乐果降解率随葡萄糖、NH4N03、KH2P04浓度的增加而增大，但当超过某一浓度时，降解率降低。并在此基础上，确定了响应面分析法优化培养基的中心试验点：葡萄糖1．5 g·L-1、NH4NO30．5 g·L-1、KH2PO41．0g·L-1。结果通过二次回归正交旋转实验确定培养基中碳源、氮源和磷源的最佳浓度为葡萄糖1．455g·L-1，NH4NO3 0．535 g·L-1，KH2PO4 0．965 g·L-1。研究了氧乐果初始浓度(200 mg··L-1-5000 mg·L-1)、温度、pH值、装液量、接种量、摇床转速对菌株YB-10在最佳培养基中降解氧乐果的影响。结果表明，随着氧乐果初始浓度的增加，氧乐果降解率减小，最适降解条件为pH 7．0、温度30℃、250 mL三角瓶装液量100 mL、接种菌悬液0．25 mL、摇床转速150 r·min-1。在最佳降解条件下，5d氧乐果由1000 mg·L-1降到226 mg·L-1，降解率达到77．24％。