十三种中国胡椒属药用植物分子生物学鉴定及化学成分分析

论文摘要

胡椒属(Piper L.)为胡椒科(Piperaceae)中最大的一个属,具有重要的商业、医学价值,民间主要用于活血、消肿、止痛。除中国外,本属植物在印度阿育吠陀体系中也有很重要的医学价值,并且在拉丁美洲、亚洲作为民间药物广为使用。近年来,通过对胡椒属植物药理作用和有效成分的研究,发现部分该属植物具有抗抑郁及镇痛活性,因此在抑郁症高发的当下,胡椒属药用植物的开发具有很高的价值。然而,由于胡椒属植物都是小型花,且有雌雄同株或异株或杂性以及两性花的现象,种间外形又极为相似,所以形态学鉴定存在较大难度,对胡椒属药用植物的开发利用造成了一定的困难。因此,本课题选择了DNA序列分析及HPLC指纹图谱技术对胡椒属药用植物的进一步开发提供鉴定方法,并对胡椒属药用植物的化学成分进行分析。本文通过聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)扩增ITS序列,比较研究了中国胡椒属药用植物核糖体DNA ITS序列的差异和规律。结果显示ITS序列与外类群ITS序列间比对同源性均小于66%,属间序列间两两比对同源性均大于81%,大于97%可作为种间鉴定指标。因而ITS序列作为中国胡椒属药用植物鉴定性状具有一定的适用性与可靠性。本课题组在胡椒属药材中提取分离得到了一系列抗抑郁活性较强及有潜在抗抑郁活性的化合物,本文通过优化色谱条件,建立了HPLC法同时测定十三种胡椒属药材的10种活性成分的含量测定方法,并进行了方法学考察,方法可行,可以准确定量；首次在石南藤、华南胡椒、山蒟、毛蒟中发现具有明显抗抑郁活性的大叶药素(laetispicine)的存在；同时对胡椒属药用植物的HPLC指纹图谱进行了分析,总结了该属指纹图谱的共同特征,并分析了8个主要品种的药用植物的HPLC指纹图谱的鉴别特征,进一步为胡椒属药材的准确鉴定提供了依据。本文通过运用DNA序列分析及HPLC指纹图谱技术,对胡椒属药用植物的ITS序列进行扩增、测序及比较,对其化学成分进行分析、测定,进而探讨了其基源准确鉴定的可行性,有助于进一步扩大有效成分的活性资源,并且为规范中药材市场,保证用药安全提供了一定的依据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 综述
• 第一节 胡椒属药用植物的本草考证
• 第二节 胡椒属药用植物的鉴定学研究
• 第三节 胡椒属植物化学成分研究进展
• 第四节 胡椒属植物药理作用研究进展
• 第五节 小结
• 第二章 ITS序列在胡椒属药材鉴定中的应用
• 第一节 DNA的提取及ITS序列的获得
• 第二节 样本同源性比对结果
• 第三节 讨论
• 第三章 胡椒属药材化学成分分析
• 第一节 胡椒属药材中有效成分含量测定方法建立
• 第二节 胡椒属药材中有效成分含量测定结果分析
• 第三节 胡椒属药材HPLC指纹图谱的鉴定
• 第四节 讨论
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 致谢