桂枝挥发油对TLR2、TLR4基因表达及其信号转导通路的影响

论文摘要

炎症是临床诸多急慢性疾病共有的主要病理过程之一，或引起机体的防御反应而被消除，或引发炎症失控而造成机体功能紊乱或器官损害。桂枝是樟科植物肉桂的嫩枝，自古以来主要应用于“表证”等诸多疾病的防治。现代研究表明炎症是表证的重要病理改变之一，桂枝挥发油（the Volatile oil of Ramulus Cinnamomi，VORC）是桂枝抗炎的主要有效部位群。课题组前期研究表明VORC对急性、慢性、免疫损伤性炎症均具有良好的拮抗效果，其抗炎作用与拮抗炎症因子生成和释放、抗氧化损伤等有关。近年来认为炎症就是炎症免疫信号转导紊乱所致，Toll信号转导尤其引人瞩目。本研究主要进行了VORC抗炎作用、对急性肺炎模型肺组织Toll信号通路关键靶分子的影响以及多个炎症信号通信“分子对话”靶点PTK活性影响的研究。 目的：探讨VORC抗炎作用与Toll炎症信号转导通路主要靶点的关系，揭示VORC抗炎作用的分子信号机理，为中药“辛味”理论提供现代科学依据。 方法：以LPS致大鼠急性肺炎等模型为研究载体，采用实时荧光定量PCR技术、基因克隆技术、免疫酶联吸附技术及病理组织形态学技术等研究手段，观察了VORC抗炎作用、VORC对肺炎模型肺组织匀浆TLR2、TLR4、MYD88基因表达，P-IκB-α、NF-κB P65、TNF-α、IL-1β含量以及PTK活性的影响，从炎性信号识别内化、胞内转导、易位入核、炎症相关基因转录、前炎症因子的产生和不同炎症信号的分子对话等角度揭示VORC抗炎作用的分子转导信号机制。 结果： 1．VORC抗炎作用研究 研究表明，VORC对二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进、角叉菜胶致大鼠足肿胀和LPS致大鼠急性肺损伤等急性炎症均有显著的拮抗作用。 2．VORC对TLR2、TLR4、MYD88mRNA表达的影响 研究表明，正常SD大鼠肺组织中有少量的TLR2、TLR4、MYD88mRNA表达，LPS尾静脉注射后6h肺组织匀浆中TLR2、TLR4、MYD88mRNA表达显著高于空白组（P＜0.05），VORC高、中、低三个剂量均可以显著抑制急性肺炎模型肺组织匀浆中的TLR2、

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩略词表
• 前言
• 实验研究
• 第一部分 桂枝挥发油的制备、GC-MS测定及急性毒性研究
• 1 VORC的制备
• 2 VORC的GC／MS鉴定
• 3 VORC的急性毒性研究
• 4 小结
• 第二部分 VORC的抗炎作用研究
• 1.实验材料
• 2 统计方法
• 3 实验方法与结果
• 4 小结
• 第三部分 VORC对Toll信号转导通路的影响
• 分题一 LPS致大鼠急性肺炎模型的复制及标本的制备
• 1 实验材料
• 2 实验方法与结果
• 分题二 VORC对TLR2、TLR4和MYD88mRNA表达的影响
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 实验结果
• 分题三 VORC对NF-κB及下游信号通路相关分子的影响
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3.统计学处理
• 4 实验结果
• 分题四 VORC对蛋白酪氨酸激酶（PTK）活性的影响
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 实验结果
• 小结
• 本研究的特色和创新点
• 讨论
• 1 VORC的抗炎作用
• 2 VORC对TLR2、TLR4mRNA表达的影响
• 2.1 VORC对TLR4mRNA表达的影响
• 2.2 VORC对TLR2mRNA表达的影响
• 3 VORC对MYD88基因表达的影响
• 4 VORC对IκBα的影响
• 5 VORC对NF-κB P65的影响
• 6 VORC对前炎症因子TNFα和IL1-B的影响
• 7 VORC对TLRs mRNA表达及信号通路关键分子的影响
• 8 VORC对蛋白酪氨酸激酶活性的影响
• 结语
• 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 综述一 Toll受体信号转导通路研究进展
• 综述二 MYD88：TLR信号转导通路中关键接头分子的研究进展
• 在读期间所发表的论文、论著及成果
• 个人简历
• 声明