Duffy抗原/趋化因子受体与白介素-8在高血压炎症反应中的变化及作用

Duffy抗原/趋化因子受体与白介素-8在高血压炎症反应中的变化及作用

论文摘要

目的:探讨在高血压炎症反应中Duffy抗原/趋化因子受体(Duffy antigen/receptor for chemokine,DARC)和其配体白介素-8(interleukin-8,IL-8)的变化及可能的作用,丰富炎症反应在高血压发生发展中的作用机制。方法:在体实验部分:收集30例原发性高血压患者(EH组),按血压水平分为1级高血压组和2级高血压组,及20例正常健康人(NC组),分别采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)检测血浆IL-8水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime-polymerase chain reaction,realtime-PCR)法检测红细胞DARC mRNA的表达。体外实验部分:体外培养人脐静脉内皮细胞(endothelial cells from human umbilical vein,HUVEC),分为对照组、AngⅡ(10-7M)组和AngⅡ(10-6M)组,分别用磷酸盐缓沖溶液(phosphate buffered solution,PBS)、10-7M和10-6MAngⅡ诱导0~24小时,收集0、6、12、24小时四个时间点的细胞培养液和内皮细胞,采用ELISA法分别检测细胞培养液和细胞裂解液IL-8水平,采用realtime-PCR法检测内皮细胞DARC mRNA的表达。应用SPSS13.0软件系统进行统计分析。结果:在体实验部分:原发性高血压组血浆IL-8水平在1级高血压组为(102.25±21.01)pg╱ml,2级高血压组为(105.93±18.93)pg╱ml,均高于对照组(66.70±13.37)pg╱ml,提示IL-8可能与高血压炎症有关。红细胞DARC mRNA表达水平在1级高血压组为2.31±0.58(相对定量),2级高血压组为3.13±0.84(相对定量),均高于对照组1.11±0.51(相对定量),提示DARC可能与高血压有关。体外实验部分:10-7M AngⅡ、10-6M AngⅡ均能诱导内皮细胞产生释放IL-8,且存在时间依赖性,6小时可检测到细胞培养液中IL-8水平升高,12小时达高峰,24小时则降低;细胞裂解液反映细胞内IL-8水平,也存在时间依赖性,但其变化与细胞培养液不平行,为6~24小时内逐渐升高,提示可能与内皮细胞DARC结合培养液中IL-8有关。AngⅡ可诱导内皮细胞DARC mRNA表达,且存在时间依赖性,6~24小时逐渐增加,支持内皮细胞DARC结合固定IL-8的功能。结论:1.原发性高血压患者血浆IL-8水平升高,红细胞DARCmRNA表达增加。2.AngⅡ能诱导内皮细胞产生释放IL-8和表达DARC。IL-8和DARC可能参与并促进高血压炎症反应的发生。

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 目录
  • 英文缩略词表
  • 第一章 前言
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 研究材料与对象
  • 2.1.1 主要试剂
  • 2.1.2 主要实验仪器
  • 2.1.3 实验对象
  • 2.1.3.1 在体实验
  • 2.1.3.2 体外实验
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 在体实验
  • 2.2.1.1 血样本采集和处理
  • 2.2.1.2 血浆IL-8浓度测定
  • 2.2.1.3 红细胞DARC mRNA表达水平测定
  • 2.2.2 体外实验
  • 2.2.2.1 人脐静脉内皮细胞株的培养和处理
  • 2.2.2.2 细胞培养液IL-8浓度测定
  • 2.2.2.3 细胞裂解液IL-8浓度测定
  • 2.2.2.4 内皮细胞DARCmRNA表达水平测定
  • 2.3 统计学处理
  • 第三章 结果
  • 3.1 在体实验
  • 3.1.1 研究对象一般临床资料比较
  • 3.1.2 血浆IL-8水平比较
  • 3.1.3 红细胞DARC mRNA表达水平比较
  • 3.2 体外实验
  • 3.2.1 细胞培养液IL-8水平
  • 3.2.2 细胞裂解液IL-8水平
  • 3.2.3 内皮细胞DARC mRNA水平
  • 第四章 讨论
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 攻读学位期间研究成果
  • 相关论文文献

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