论文摘要
目的:体外培养大鼠肝细胞BRL,测定微囊藻毒素LR对细胞增殖、凋亡、氧化损伤的影响以及修复基因JWA、XRCC1、PRAP1的变化,探讨微囊藻毒素LR致大鼠肝细胞BRL氧化损伤对修复基因JWA、XRCC1、PRAP1的影响。方法:1.分别以0、1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝细胞BRL24h、48h和72h,用MTT法检测细胞增殖与凋亡情况。2.分别以0、1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝细胞BRL 48h,测定细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、超氧化物岐化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）的含量及乳酸脱氢酶（LDH）的漏出率。3.分别以0、1、5、10、30μg/mlMC-LR染毒大鼠肝细胞BRL24h、48h和72h,应用实时荧光定量PCR技术测定JWA、XRCC1和PRAP1基因mRNA的表达量变化。结果:1.与不加毒素的对照组细胞相比,各染毒组（1、5、10、30μg/ml）MC-LR抑制BRL细胞生长,MC-LR染毒剂量越高,细胞吸光度值越低;并随着MC-LR染毒时间延长,细胞吸光度值逐渐降低,呈剂量效应关系和时间效应关系。2.与不加毒素的对照组细胞相比,各染毒组（1、5、10、30μg/ml）MC-LR染毒BRL细胞48h,细胞内MDA含量有增加的趋势,但无统计学差异;30μg/ml染毒组T-SOD、GSH-PX含量下降, 10、30μg/ml染毒组LDH漏出率增加,差异有统计学意义。3.与不加毒素的对照组细胞相比,30μg/ml MC-LR染毒48小时BRL细胞PARP1基因表达下降,染毒72小时BRL细胞JWA、XRCC1和PARP1基因均表达下降。结论:1. 1-30μg/ml MC-LR可以抑制大鼠肝细胞BRL的增殖,呈现剂量效应关系和时间效应关系。2. MC-LR可引起BRL细胞氧化应激损伤,10、30μg/ml MC-LR引起细胞LDH漏出率增加,30μg/ml MC-LR引起细胞T-SOD、GSH-PX含量下降。3.本实验条件下,MC-LR可引起修复相关基因JWA、XRCC1和PARP1表达改变。30μg/mlMC-LR染毒BRL细胞48小时使PARP1基因表达下降,染毒72小时使JWA、XRCC1和PARP1基因表达下降。
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