张铭玉（福建宁德市中医院福建宁德352100）
【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）33-0180-02
【摘要】目的建立叠加对比气相色谱法测定泌感颗粒中五味子甲素等四种成分的含量。方法采用水蒸气蒸馏法从制剂中提取挥发油成分，进而以程序升温的方式在HP-5石英毛细管色谱柱(30.0m×0.32mm,i.d.×0.50μm)上进行分离，用氢焰离子化检测器进行检测。结果方法的最低检测限均低于2.1μg·mL-1，精密度不大于2.4%(RSD)，四种成分的加样回收率在91.4-99.3%之间。结论本方法可用于泌感颗粒中五味子甲素等四种成分的含量测定。
【关键词】气相色谱叠加对比法
中药制剂泌感颗粒中含有多种有效成分，其中五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲和欧前胡素均有挥发性[1]。为了控制制剂质量、保证制剂的稳定性和均匀性，本文探索并建立了叠加对比气相色谱法测定以上四种成分的含量。
1材料
Agilent6890N型气相色谱仪配FID检测仪（美国安捷伦公司）；ChemStation工作站（美国安捷伦公司）；BS110S电子天平（德国Sartorius公司）；泌感颗粒（自制，批号：20080901，20080923，20081009）；五味子甲素（批号：0764-200006）、五味子乙素（批号：0706-200003）、五味子醇甲（批号：110857-200304）、欧前胡素（批号：11826-200308）均购自中国药品生物制品检定所；试剂均为分析纯，水为重蒸水。
2方法与结果
2.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱为：HP-5PhenylMethylSiloxanecapillarycolumn（30.0m×0.32mm，0.50μm）；载气：高纯度N2；载气流速：1.2mL·min-1；检测器：氢焰离子化检测器（FID）；燃气为：氢气（30mL·min-1）和空气（300mL·min-1）；检测器温度：280℃，进样口温度：230℃；进样量：1L；分流比：1:50；升温程序为：150℃维持3min后，以10℃·min-1的速度升至210℃，接着以5℃•min-1的速度从210℃升至240℃，再以10℃•min-1的速度升至280℃，维持5min。
2.2溶液制备
2.2.1供试品溶液的制备取本品12.0g，精密称定，置圆底烧瓶中，加入80mL重蒸水，照《中国药典》2005年版一部附录XD挥发油测定法装置，100℃加热提取3.5h，停止加热，放冷，将侧颈瓶中的挥发油和水（大约5mL）倒入25mL的分液漏斗中，用正己烷萃取两次，每次5mL，合并萃取液，用无水硫酸钠脱水处理后，用正己烷定容至25mL，得储备供试液。将1.0mL储备供试液用正己烷稀释至10mL，用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
2.2.2对照品溶液的制备精密称取五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、欧前胡素对照品适量，混合，用正己烷溶解，得到浓度分别为0.0600，0.240，0.300和0.0600mg•mL-1的混合储备标准液。另取上述储备供试液1.0mL，再加入1.0mL上述混合储备标准液，用正己烷稀释并定容至10mL，用微孔滤膜滤过，即得对照品溶液。
2.3线性关系考察取已知含量的本品12g，精密称定，置圆底烧瓶中，照“供试品溶液的制备”方法制成储备供试液。精密量取5份该储备供试液各0.5mL分别置于10mL的量瓶中，在其中4份溶液中依次加入0.5，1.5，2.5，3.5mL储备标准液。将以上5份溶液加正己烷稀释至刻度，混匀，进样分析，每份两针，记录色谱图，求每份样品中待测成分峰面积与参比峰峰面积比的平均值，再将此峰面积比的平均值与溶液中待测成分的浓度进行线性回归。
2.4精密度和准确度取供试品溶液，重复进样6次，记录色谱图，计算五味子甲素等4个成分色谱峰峰面积与参比峰峰面积比的相对标准偏差。
3讨论
叠加法的理论研究和应用较早[2]，但限于技术等原因，应用范围不广。随着仪器分析技术的发展和复杂样品分析工作的需要，叠加对比法开始应用于分析领域，孙国祥教授等还对毛细管电泳叠加对比法的测定误差进行了理论推导[3]。叠加对比法用相对峰面积替代了峰面积的绝对值，因此可以克服外标法中进样量不准确、仪器波动等所带来的定量误差。该法还巧妙的利用了样品中原有成分的色谱峰作为参比峰，避免了内标法在分析复杂样品时较难找到合适的内标物或者色谱峰过于密集，无处可插入内标峰的困惑。总之，叠加对比法虽然不加内标物，却具有内标法的优点，尤其适用于分析成分复杂的样品，如中药等[4]。
参考文献
[1]孙毓庆,王延琮,等.现代色谱法及其在药物分析中的应用[M].北京:科学出版社,2010:279-280.
[2]寇登民,云希勤,李艳红,等.气相色谱叠加定量方法的研究[J].分析化学,2009,20(5):597-599.
[3]王静华,王宏伟.叠加定量气相色谱法测定吹苯残渣中的三苯含量[J].化学工程师,2009,3(60):54-55.
[4]孙国祥,苗菊茹,王宇,等.毛细管电泳叠加对比法测定阿片粉中吗啡的含量[J].色谱,2010,20(1):69-70.