论文摘要
目的：探讨以16SrRNA和18SrRNA基因为基础的细菌聚合酶链反应（PCR）法诊断急性胰腺炎并发全身性感染的价值和感染的病原体的特点。探索一种迅速检测细菌感染的方法。方法：选取2009年9月～2010年12月间收住昆明医学院第一附属医院的急性胰腺炎患者98例,（女30例,男68例,年龄14-89岁）,不同时期不同部位标本106份,（12份痰标本,18份腹水标本。76份血标本）。患者按中国急性胰腺炎诊治指南（2007年）诊断标准纳入。利用细菌16SrRNA基因和真菌18SrRNA的高度保守性,设计并合成通用引物,提取细（真）菌DNA进行聚合酶链反应（PCR）,采用2%琼脂糖凝胶电泳（AGE）观察扩增结果,并进行PCR灵敏性和特异性试验。PCR结果与常规培养结果进行比较。用SPSS11.5 For Windows进行临床资料数据分析。结果：所有细菌PCR均得到预期约1500bp的扩增产物,该引物仅扩增细菌DNA,与病毒及人基因组DNA无交叉反应,其扩增下限为10CFU/ml大肠埃希菌。所有真菌PCR均得到预期约197bp的扩增产物,该引物仅扩增真菌DNA,与细菌及人基因组DNA无交叉反应,其扩增下限为10CFU/ml白色假丝酵母菌。106份不同类型标本中,常规培养阳性率为20.75%（22/106）,其中细菌培养阳性率19.81%（21/106）,真菌培养阳性率0.94%（1/106）；用PCR法检测总阳性率为32.07%（34/106）,其中细菌16SrRNA基因PCR阳性率28.30%（30/106）,真菌18SrRNA基因PCR阳性率3.77%（4/106）；培养和PCR一致阳性率为18.87%（20/106）。PCR法优于培养法（P<0.05）。且其灵敏度为90.9%（20/22）,特异度为83.33%（70/84）。只需6-8小时就可出结果,而培养方法则需3天。感染部位以腹腔最多,其次为呼吸道,再次为血液。结论：以16SrRNA和18SrRNA基因为基础的PCR法对诊断急性胰腺炎并发全身性感染有较高的快速性,敏感性及特异性。感染菌以大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌为主。目的：检测急性胰腺炎患者血清降钙素原的表达和意义,探讨降钙素原预测急性胰腺炎继发细菌感染的临床价值。方法：选取第一部分入选急性胰腺炎患者其中的76例,（男51例,女25例,年龄14-72岁）。AP患者根据是否合并SIRS,分为非SIRS组（15例）和SIRS组,SIRS组再根据是否合并细菌感染分为SIRS组（53例）和脓毒症组（8例）,分别在入院1周时采集入选患者血清,并采集临床指标CRP,用酶联免疫吸附试验方法（ELISA）测定血清PCT含量。应用SSPS11.5 for Windows软件进行统计学处理。并根据第一部分PCR检测结果比较CRP和PCT对于AP继发感染的预测能力,绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线）结果：血清PCT定量酶联免疫检测结果显示SIRS感染组患者PCT水平（2.68±0.84）ng/ml明显高于非SIRS组（0.97±0.56）ng/ml和SIRS组（1.39±0.58）,（P<0.01）ng/ml（P<0.01）,但三组CRP值无显著性差异（P>0.05）。根据第一部分PCR检测结果,绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线）,PCT（AUC=0.737,P=0.001）对感染的预测能力明显强于CRP（AUC=0.703,P=0.004）。以2.0ng/ml为预测阈值其敏感性为74.1%,特异性为67.5%。结论：PCT是AP继发感染早期较好的预测和观察指标。