论文题目: RAPD技术在商品药材玉竹鉴定中的应用
论文类型: 硕士论文
论文专业: 中药学
作者: 林丽美
导师: 刘塔斯,刘春林
关键词: 玉竹,黄精,多态性,中药鉴定
文献来源: 湖南中医药大学
发表年度: 2005
论文摘要: 玉竹为百合科(Liliaceae)黄精属(Polygonatum)玉竹(Polygonatum odoratum)的根茎,是一味常用中药材,也是湖南的道地药材之一。对玉竹的鉴定,国内外文献资料报道目前主要采用的方法是性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别。我们首次从分子水平方面来探讨其遗传差异并对其进行鉴别研究。我们的研究工作是建立在原有工作基础之上,扩大了样品量,对全国各产地的商品药材玉竹及其混淆品黄精进行了分析,探讨了RAPD技术在商品药材玉竹及其真伪鉴别中的应用与药材道地性的分析,为商品药材玉竹鉴定建立了一种新的方法。本研究不仅解决了原研究工作的不足之处,还从更深的层次来研究遗传背景。研究方法:采用RAPD技术对商品药材玉竹类基因组DNA的多态性进行分析,利用NTSYS软件进行各品种间UPGMA聚类分析。研究结果表明:1、建立了一种适合商品药材玉竹基因组DNA的提取方法。2、确定了适合玉竹的最佳PCR-RAPD反应体系;3、从200多个随机引物(10-mer)中筛选出24个,对所有供试材料进行正式扩增,共获得24张DNA指纹图谱,162条DNA谱带,其中143条为多态带;4、建立了基于RAPD技术的玉竹亲缘关系树型图,树型图的聚类结果与用经典方法研究的结论一致:5、运用RAPD技术为从分子水平阐明药材道地性的生物学实质提供了可能。6、提出了道地药材的玉竹在基因水平上已产生了遗传变异的新观点。本研究采用RAPD方法鉴别商品药材玉竹及其混淆品同属植物黄精,并对湖南道地产地的玉竹与其它产地的玉竹进行分析,突破了传统的鉴别方法,是商品药材玉竹鉴定的一个新的有益的尝试。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
引言
一、实验材料
1、实验仪器
2、实验试剂
3、实验地点
4、实验样品
二、实验研究流程图
三、实验内容
(一)、实验样品总DNA的提取
1、实验样品总DNA的提取方法比较
2、实验样品总DNA的提取
3、试剂盒提取剩余实验样品总DNA
(二)、RAPD反应体系的优化
1、模板的制备
2、反应组分和参数对RAPD的影响
3、最佳反应体系的确定
4、RAPD-PCR扩增程序
(三)、随机引物的筛选和PCR扩增
1、随机引物的筛选
2、PCR扩增
四、实验结果
1、DNA多态性
2、供试样品特有的RAPD标记
3、供试样品相似性系数的计算和结果
4、供试样品遗传距离及聚类分析
五、讨论
1、关于实验过程的讨论
2、关于实验结果的讨论
六、结论与展望
1、结论
2、展望
七、本研究的创新性
八、致谢
九、参考文献
附录:分子标记中DNA提取方法的研究进展
发布时间: 2009-10-21
参考文献
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