忍冬茎叶中绿原酸的提取纯化工艺研究

论文摘要

绿原酸是一种有广泛活性的多酚类化合物,具有抗氧化、抗癌、抗肿瘤、抗衰老等功效,已经被广泛应用于医药、食品及日常化工等各个领域,开发前景十分广阔。我国主要从金银花和杜仲皮中提取绿原酸,生产成本高,不能满足市场需求。忍冬茎叶富含绿原酸,且多未加以利用。因此,开发从忍冬茎叶中提取、分离和纯化绿原酸的工艺具有极其重要的经济价值。本文以忍冬茎叶为原料,研究了绿原酸提取纯化工艺,旨在开发一种低生产成本、高提取率、高纯度、低废弃物污染的工艺,为工业化生产绿原酸提供参考。本研究主要内容包括乙醇回流提取忍冬茎叶中绿原酸工艺、大孔树脂富集纯化粗提物中绿原酸及硅胶柱和重结晶精制绿原酸工艺的研究。主要研究结果如下:1比较乙醇回流法和超声法提取忍冬茎叶中绿原酸的提取率,根据结果选择乙醇回流法作为提取方法。通过单因素试验、正交试验及最佳工艺验证试验,确定了最佳工艺参数为:乙醇浓度70%,料液比1:14,浸提时间2 h,提取温度60℃,溶剂pH 6。该条件下绿原酸平均提取率达1.37%。2采用大孔树脂富集忍冬茎叶中绿原酸,通过静态吸附与解吸试验对4种不同类型的大孔树脂进行筛选,根据吸附能力、吸附率和解吸率确认D-101树脂是富集纯化绿原酸的最适宜树脂。动力吸附曲线结果表明D-101树脂2 h可基本吸附完全忍冬茎叶中绿原酸,平衡吸附等温线确定适宜的样品中绿原酸浓度为1.01 mg·mL-1。动态吸附和解吸试验确定最佳工艺参数为:上样液pH 4,上样流速2 BV·h-1,上样量5 BV,20%乙醇溶液洗脱10 BV,绿原酸产品的最终纯度为50.72%,回收率为54.44%。3经D-101大孔树脂富集绿原酸的浸膏经硅胶柱层析和乙酸乙酯-甲醇重结晶,绿原酸最终纯度达到97.96%。本文系统研究了忍冬茎叶中绿原酸提取、富集纯化工艺及精制方法,建立了乙醇回流提取和D-101树脂富集纯化绿原酸的工艺参数,并确定了绿原酸精制的方法。该研究为合理利用忍冬茎叶废弃物资源,规模化生产绿原酸提供了理论与实验依据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 忍冬概述
• 1.1.1 忍冬的植物形态及资源分布
• 1.1.2 忍冬茎叶的主要化学成分
• 1.2 绿原酸概述
• 1.2.1 绿原酸类化合物化学资源
• 1.2.2 绿原酸化学结构及理化性质
• 1.2.3 绿原酸的生物合成和化学合成
• 1.2.4 绿原酸的生物活性
• 1.2.5 绿原酸的分析测定
• 1.2.6 绿原酸的提取方法
• 1.2.7 绿原酸的分离纯化
• 1.2.8 绿原酸应用现状与展望
• 1.3 立题依据和研究目的
• 第二章 忍冬茎叶中绿原酸的提取工艺研究
• 2.1 材料、试剂与仪器
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 试剂
• 2.1.3 仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 忍冬茎叶提取液中绿原酸的含量测定
• 2.2.2 提取方法筛选比较
• 2.2.3 单因素试验
• 2.2.4 正交试验
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 提取方法筛选比较结果
• 2.3.2 单因素试验
• 2.3.3 正交试验结果
• 2.3.4 最佳工艺验证试验结果
• 2.4 结论与讨论
• 2.4.1 忍冬茎叶中绿原酸提取的工艺方法和影响因素
• 2.4.2 忍冬茎叶中绿原酸提取工艺最佳参数
• 第三章 大孔树脂分离纯化忍冬茎叶中绿原酸的工艺研究
• 3.1 材料、试剂与仪器
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 试剂
• 3.1.3 仪器
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 大孔树脂的预处理
• 3.2.2 HPLC 测定绿原酸含量
• 3.2.3 静态吸附和解吸试验
• 3.2.4 动态吸附和解吸试验
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 吸附能力、吸附率和解析率
• 3.3.2 D-101 和LSD-001 树脂的吸附动力学
• 3.3.3 D-101 树脂吸附等温线
• 3.3.4 泄露曲线
• 3.3.5 上样液pH 的影响
• 3.3.6 上样液流速的影响
• 3.3.7 D-101 树脂的动态解吸试验
• 3.5 结论与讨论
• 3.5.1 大孔树脂对绿原酸吸附和解吸的影响因素
• 3.5.2 大孔树脂分离纯化忍冬茎叶中绿原酸的最佳工艺参数
• 第四章 忍冬茎叶中绿原酸的纯化精制
• 4.1 材料、试剂与仪器
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试剂
• 4.1.3 仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 绿原酸纯化工艺的研究
• 4.2.2 绿原酸含量和纯度检测
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 绿原酸的定性检测
• 4.3.2 绿原酸的定量检测
• 4.4 结论与讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介