抗HIV-1单链抗体重组白喉毒素的构建与表达研究

论文摘要

重组免疫毒素被称为“生物导弹”，是目前肿瘤、自身免疫性疾病以及移植排斥等免疫治疗领域的热点研究方向之一。对于AIDS而言，由于免疫毒素能够特异性的杀伤HIV潜伏感染细胞，彻底摧毁病毒储存池，而对正常细胞毒性很低，从而成为当前HAART辅助治疗的亮点。 为了获得针对HIV-1的无毒副作用且能根除体内病毒的药物，进行了重组免疫毒素的表达，期望其针对HIV病毒和感染细胞的特异杀伤作用可以最终实现抗病毒这一治疗目的。 将获得的单链抗体（ScFv）基因分别代替白喉毒素DT的受体结合区以及白喉毒素DT的受体结合区和跨膜区，制备出重组毒素基因DT-ScFv，利用原核表达载体pET28a，构建了用于表达重组毒素的原核表达质粒pET-DT-hS120、pET-DTA-hS120，上述质粒转化受体菌BL21（DE3）后，经IPTG诱导，成功地表达了目的蛋白，表达量分别为21％，23％，并利用Ni-NTA金属螯合层析法对表达产物进行了纯化及复性处理。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 第一章 绪论
• §1.1 引言
• §1.2 免疫毒素研究进展
• §1.3 论文研究的目的和内容
• 第二章 抗HIV-1重组DT毒素原核表达载体的构建
• §2.1 材料与方法
• §2.2 结果
• §2.3 讨论
• §2.4 小结
• 第三章 抗HIV-1重组DT毒素的原核表达
• §3.1 材料与方法
• §3.2 结果
• §3.3 讨论
• §3.4.小结
• 第四章 抗HIV-1重组DT毒素的复性和初步纯化
• §4.1 材料与方法
• §4.2 结果
• §4.3 讨论
• §4.4 小结
• 结论
• 致谢
• 参考文献