论文摘要
现代分子生物学研究表明,癌变细胞的共同特征是与细胞分裂和分化有关的基因出现异常,将正常基因植入靶细胞代替遗传缺陷基因或关闭、抑制异常表达的基因,可以达到预防和治疗肿瘤的目的。反义治疗（antisense therapy）就是在体外合成一段能与目的基因DNA或RNA互补的小分子的寡核苷酸片段,转入靶细胞,选择性地关闭或抑制致病基因的表达,从而起到防治疾病作用的一种治疗方法。反义治疗因其具有高特异性和低毒副作用,在肿瘤治疗学研究中颇受重视,研究进展极为迅速,经不断改进和完善,已逐步进入临床,并显示出辉煌的应用前景。 1 基本原理 肿瘤的组织学特点是细胞生长失控、过度增殖、分化停止并呈现某些胚胎性状。因此通过抑制细胞周期的基因,或增强诱导细胞终末分化的基因表达,可以调节细胞周期,促进癌变细胞向终末阶段分化。反义寡核苷酸则是通过Watson Crick碱基互补原则,与目的基因或mRNA杂交,从而阻止基因的表达,抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡,达到防止癌症的目的。反义寡核苷酸对基因表达的抑制作用可通过多种不同机制而实现:①抑制基因转录,即反义寡核苷酸与DNA双螺旋分子的特定序列结合形成三螺旋DNA以阻止基因的转录。②抑制RNA的加工,主要是抑制mRNA前体的剪接。③抑制RNA的翻译,如果反义寡核苷酸序列与目的mRNA翻译起始序列互补,二者杂交结合,可阻止mRNA进入核糖体,而抑制翻译的起始。如果反义寡核苷酸与mRNA起始位点下游序列互补,二者结合能阻止核糖体在mRNA上的移动而终止翻译的进行。④诱导RNA seH（RNA酶H）介导的RNA降解作用,这可能是反义抑制作用的最主要的机制。RNA seH是一种核酸内切酶,普遍存在于细胞质或（和）细胞核内,在细胞核内的浓度较高,能参与DNA的复制,在细胞内也可能具有其他功能。RNA seH能裂解DNA-RNA杂化双链中的RNA链。当反义寡核苷酸与目的mRNA结合形成杂化双链时,即可启动RNAseH的裂解功能,将目的RNA链降解,从而抑制基因表达蛋白的产生。
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