白毛藤多糖注射剂的研制及药理作用研究

论文摘要

【研究背景】现代养殖条件下，动物细菌性、病毒性疾病的发生和流行呈现出一些新的特点，给动物疫病的防治带来新的困难，西药的防治虽然取得了一定的效果，但由于滥用药物导致抗药性产生、药物残留和环境污染等一系列问题，使得在现阶段寻找和开发新药已成为畜牧业研究的重点。中草药因其毒副作用小、药物残留低、不易产生耐药性等特点成为众多学者研究的方向。我国虽然拥有丰富的中草药资源，但一直未得到合理的开发和充分利用，特别对中草药有效成分和药理学研究还不够深入。因此，合理开发中草药制剂防治动物疾病具有重要意义。已有研究表明白毛藤具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤和增强免疫的作用。但有关白毛藤多糖注射剂的研制、体外抑菌抗病毒作用及作为免疫增强剂的研究还尚未见报道。【目的】(1)白毛藤多糖注射剂的制备及安全性评价；(2)白毛藤多糖注射剂的体外抑菌和抗病毒效果研究；(3)白毛藤多糖注射剂对鸡免疫药理作用研究。【方法】(1)采用水提醇沉法提取多糖、按制剂法要求制备白毛藤多糖注射剂，并按药物安全毒理学评价标准对注射剂进行安全性评价。(2)采用杯碟法测定白毛藤多糖注射剂体外抑菌效果，并采用对倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌溶度(MBC)；采用组织细胞培养法测定其抗病毒效果。(3)将1日龄健康非免疫三黄雏鸦随机分成5组，Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别肌内注射不同剂量的白毛藤多糖注射剂，连续7d，在期间对Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别接种鸡新城疫病毒(NDV)油乳剂灭活苗0.2ml／只，Ⅴ组为生理盐水对照组。取脏器制组织切片，观察形态学变化，取血样进行处理后采用试剂盒法、红细胞花环法、间接血凝抑制法、逆转录聚合酶链式反应方法检测各项免疫指标。【结果】(1)白毛藤多糖注射剂澄清透明，PH值符合要求，该注射剂基本无毒性，无热原性，无刺激性，肌肉注射安全、可靠。(2)体外抑菌试验结果表明：白毛藤多糖注射剂对大肠杆菌、链球菌、金葡萄球菌、沙门氏菌均有较强的抑菌作用，其MIC分别为5.00mg／ml，2.50mg／ml，1.25mg／ml，2.50mg／ml；采用组织细胞培养法进行抗病毒试验，证明注射剂具有显著的抗病毒活性。(3)白毛藤多糖注射剂能增强鸡体的特异性和非特异性免疫功能。【结论】白毛藤多糖注射剂制备方法简单，性状稳定，安全可靠，其制剂适宜于肌内注射。药效学研究表明，白毛藤多糖具有较强的体外抑菌抗病毒活性，可作为免疫增强剂增强鸡体的免疫效果。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述及前言
• 1 白毛藤研究进展
• 1.1 白毛藤概述
• 1.2 白毛藤药理作用研究进展
• 1.3 白毛藤的临床应用现状
• 1.4 白毛藤主要有效成分的研究现状
• 2 生物活性多糖的研究进展与应用
• 2.1 生物活性多糖的研究进展
• 2.1.1 多糖的研究领域
• 2.1.2 多糖来源、分类及理化性质
• 2.1.3 多糖的提取与分离纯化
• 2.1.4 多糖的化学结构
• 2.1.5 多糖的免疫活性研究
• 2.2 生物活性多糖的应用
• 2.2.1 用于抗细菌作用
• 2.2.2 用于抗病毒治疗
• 2.2.3 用于抗凝血作用
• 2.2.4 用于抗肿瘤作用
• 2.2.5 用于抗衰老作用
• 2.2.6 用于抗炎及抗溃疡作用
• 2.2.7 在动物生产中的应用
• 3 中草药注射剂定义、特点与发展
• 3.1 中草药注射剂的特点
• 3.2 中草药注射剂的发展
• 4 本研究立论依据、研究内容和技术路线
• 4.1 立论依据
• 4.2 研究内容
• 第二章 白毛藤多糖注射剂的制备及安全性评价
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 药物及试验动物
• 1.1.2 主要仪器和试剂
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 白毛藤多糖的提取及其注射剂的制备
• 1.2.1.1 白毛藤多糖的提取及鉴定
• 1.2.1.2 白毛藤多糖注射剂的制备
• 1.2.2 白毛藤多糖注射剂的性状研究
• 1.2.3 白毛藤多糖注射剂的急性毒性研究
• 1.2.4 白毛藤多糖注射剂对小鼠血液生理生化指标检测
• 1.2.5 白毛藤多糖注射剂的热原性检查
• 1.2.6 白毛藤多糖注射剂的刺激性检查
• 2 结果与分析
• 2.1 白毛藤多糖的提取及鉴定结果
• 2.2 白毛藤多糖注射剂的的性状
• 2.3 白毛藤多糖注射剂的安全性
• 2.3.1 白毛藤多糖注射剂最大耐受量试验结果
• 2.3.2 白毛藤多糖注射剂对小鼠血液学指标的影响
• 2.3.3 白毛藤多糖注射剂对小鼠血清蛋白的影响
• 2.3.4 白毛藤多糖注射剂的热原性
• 2.3.5 白毛藤多糖注射剂的刺激性
• 3 讨论
• 第三章 白毛藤多糖注射剂的体外抑菌和抗病毒作用研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 主要仪器
• 1.1.2 药物和试剂
• 1.1.3 菌种与病毒
• 1.1.4 试剂和培养基的配制
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 体外抑菌试验
• 1.2.2 体外抗病毒试验
• 2 结果与分析
• 2.1 白毛藤多糖注射剂的体外抑菌试验结果
• 2.1.1 体外抑菌作用
• 2.1.2 MIC和MBC的测定结果
• 2.2 白毛藤多糖注射剂的体外抗病毒效果
• 2.2.1 对鸡胚新城疫病毒繁殖的抑制作用
• 0、TD₅₀)及抗病毒活性IC₅₀测定结果'>2.2.2 药物细胞毒性(TD₀、TD₅₀)及抗病毒活性IC₅₀测定结果
• 2.2.3 体外抑制NDV分组试验结果
• 3 讨论
• 第四章 白毛藤多糖注射剂的免疫药理作用研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验动物
• 1.2 仪器设备及试剂
• 1.3 实验方法
• 1.3.1 试验用鸡及设计
• 1.3.2 样品采集及处理
• 1.3.3 检测项目及方法
• 2 结果与分析
• 2.1 白毛藤多糖注射剂对鸡NDV灭活疫苗免疫功能的影响
• +淋巴细胞百分率测定的影响'>2.1.1 对鸡淋巴细胞百分率及ANAE⁺淋巴细胞百分率测定的影响
• 2.1.2 对鸡红细胞免疫功能的影响
• 2.1.3 对鸡NDV抗体水平的影响
• 2.1.4 对鸡免疫器官重量的影响
• 2.1.5 对鸡免疫器官组织学观察的结果
• 2.2 白毛藤多糖注射剂对鸡IL-2基因转录的影响
• 3 讨论
• 3.1 关于白毛藤多糖注射剂对鸡NDV灭活疫苗免疫功能的影响
• 3.1.1 关于免疫器官
• 3.1.2 关于淋巴细胞免疫
• 3.1.3 关于红细胞免疫
• 3.2 关于白毛藤多糖注射剂对鸡IL-2转录的影响
• 第五章 结论和创新点
• 1 结论
• 2 创新点
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历