促甲状腺激素(TSH)对血管内皮细胞影响的作用及机制研究

论文摘要

目的：甲状腺功能减退增加了动脉粥样硬化发生的危险,主要由于甲状腺激素水平降低所导致的,而亚临床甲状腺功能减退（SCH）亦伴血清中致动脉粥样硬化脂质的改变,导致动脉粥样硬化的发生发展。SCH表现为血清促甲状腺激素（TSH）水平升高,甲状腺激素水平正常。血管内皮细胞损伤和功能紊乱是动脉粥样硬化发生、发展的始动和关键因素。通过探讨TSH对人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）影响的作用,探讨TSH促进动脉粥样硬化的机制。方法：用实时荧光定量PCR方法,检测TSH作用内皮细胞后eNOS、PGI2、ET-1及PAl-1基因mRNA的表达水平。在本实验中,用无血清培养基培养细胞,检测TSH对上述敏感基因的剂效性和时效性关系。结果：与正常对照组相比,TSH刺激内皮细胞后eNOS、PGI2基因mRNA的表达水平呈现浓度、时问依赖性降低,而ET-1、PAI-1基因mRNA的表达水平呈现浓度、时间依赖性增高,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论：TSH损伤血管内皮细胞,促进动脉粥样硬化。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩略词表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要工作液配制
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 人脐静脉血管内皮细胞株（ECV304）的复苏
• 2.2.2 人脐静脉血管内皮细胞传代培养
• 2.2.3 人脐静脉血管内皮细胞的冻存
• 2.2.4 四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色分析法检测人脐静脉血管内皮细胞活力
• 2.2.5 RT-qPCR
• 2.3 统计学处理
• 第三章 结果
• 3.1 倒置相差显微镜下观察ECV304
• 3.2 MTT法测定细胞活力
• 3.3 不同浓度的bTSH作用不同时间对ECV304的影响
• 2基因mRNA表达的影响'>3.3.1 不同浓度的bTSH作用不同时间后对ECV304上eNOS、PGI₂基因mRNA表达的影响
• 3.3.2 不同浓度的bTSH作用不同时间后对ECV304上ET-1、PAI-1基因mRNA表达的影响
• 3.3.3 ECV304上各个基因的扩増及溶解曲线
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 创新点与局限性
• 参考文献
• 在学期间的研究成果
• 致谢