论文摘要
目的通过建立药物法致大鼠急性心肌缺血及急性心肌梗死模型,综合评价荭草苷（orientin,Ori）的抗心肌缺血药效,并初步探索其心血管系统保护作用机制,旨在为Ori的开发研究提供实验依据。方法分别建立垂体后叶素（posterior pituitary, Pit）致大鼠急性心肌缺血模型、异丙肾上腺素（isoproterenol, Iso）致大鼠急性心肌缺血模型和ISo致大鼠急性心肌梗死模型；采用多道生理记录仪采集心电图（electrocardiogram, ECG）、血流动力学指标,紫外分光光度法检测血清心肌酶活性,光镜观察心肌组织病理学改变,羟胺法检测血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px）活性,ELISA法检测心肌组织环鸟苷酸（cyclic guanosine monophosphate, cGMP）水平。结果1.快速舌下静脉注射1.5U/kg Pit后,大鼠ECG呈现典型心肌缺血两期变化。一期变化表现为注射Pit后即刻出现ST段抬高,二期变化在注射Pit 20-30s后出现,ECG表现为ST段压低,R波波幅升高,心率减慢（P <0.001 vs. Con）。2.灌胃给药7天后,地尔硫卓、卡托普利、异山梨酯及盐酸普萘洛尔均可抑制Pit引起的ST段高度变化（P<0.05或P<0.01或<0.001 vs. Mod）。地尔硫卓可使大鼠缺血持续时间从（410±173）s缩短至（152±202）s（P<0.05 vs. Mod）。异山梨酯可使R波波幅从（0.102±0.067） mV降低至（0.060±0.041） mV （P<0.05 vs.Mod）。3.腹腔注射Ori 4天后,大鼠心肌缺血损伤程度减轻。1.0mg/kg Ori抑制Pit诱导的大鼠心肌缺血ST段高度变化（P<0.05或P<0.01或P<0. 001 vs. Mod）。1.0 mg/kg Ori可使大鼠缺血持续时间从（361.6±209.4）s显著缩短至（24.3±31.9） s （P<0.01 vs. Mod）,并可使大鼠心率从（292±46） beat/min恢复至（334±76） beat/min （P<0.05 vs. Mod）。0.5 mg/kg Ori也可在一定程度上减小大鼠ST段高度变化,缩短缺血持续时间,并加快心率,但与模型组比较无统计学差异。4.皮下注射小剂量Iso （0.6 mg/kg）,能引起大鼠ST段明显抬高或倒置（P<0.05或P<0.01或P<0.001 vs. Con）;注射Iso 10 min后,可引起大鼠心率减慢（P<0.001 vs. Con）。皮下注射0.6 mg/kg Iso后1 min内,立即舌下静脉注射2.0 mg/kg Ori治疗,可有效抑制ISo引起的ST段高度变化（P<0.05 vs. Mod）。静脉给予1.0 mg/kg Ori治疗的大鼠未见显著疗效,与模型组比较无统计学差异。此外,1.0 mg/kg及2.0 mg/kg Ori对0.6 mg/kg Iso引起的心率减慢未见显著影响。5.皮下注射大剂量Iso （85 mg/kg）,可引起大鼠ST段明显抬高（P<0. 001 vs. Con）;并导致左室内压最大上升速率（+dp/dt Max）及左室收缩指数（contraction index, CI）降低,左室舒张末期压（left ventricular end diastolic pressure, LVEDP）、左室内压最大下降速率（-dp/dt Max）及左室心肌松弛时间常数（τ）升高（P<0.01或P<0.001 vs. Con）。模型组大鼠血清乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase, ALT）及谷草转氨酶（aspartate aminotransferase, AST）活性显著升高（P<0.01 vs.Con）；模型组大鼠与正常对照组比较,心肌纤维变性坏死,毛细血管扩张,心肌细胞间质水肿等；模型组大鼠血清SOD和GSH-Px活性降低（P<0.05或P<0.001 vs. Con）,心肌组织cGMP水平下降（P<0.05或P<0.001 vs.Con）。与模型组比较,预防性腹腔注射2.0 mg/kg Ori连续7天,可使大鼠ST段高度变化从（0.090±0.070）mV降低至（0.059±0.028）mV（P<0.05 vs.Mod）。预防性给予1.0 mg/kg及2.0 mg/kg Ori可改善大鼠血流动力学指标,1.0 mg/kg及2.0 mg/kg Ori可使+dp/dt Max从（4170±870）mmHg/s分别升高至（5276±1572）mmHg/s和（5728±874）mmHg/s（P<0.01或P<0.001 vs.Mod）,使CI从（68±4）s-1分别升高至（82±19）s-1和（89土2）s-1（P<0.01或P<0.001 vs.Mod）,使-dp/dt Max从（-3399±53）mmHg/s分别降低至（-4223±1410）mmHg/s及（-4999±917） mmHg/s（P<0.01 vs. Mod）,并使τ值从（0.048土0.021）s分别降低至（0.031±0.006）s及（0.021±0.009）s（P<0.05或P<0.01 vs.Mod）;预防性给予2.0 mg/kg Ori还可使LVEDP从（21±7）mmHg降低至（16±9）mmHg （P<0.01 vs.Mod）。预防性给予1.0 mg/kg及2.0 mg/kg Ori可降低大鼠血清心肌酶水平,2.0 mg/kg Ori可使血清LDH活性从（1297±302）U/L降低至（982±27）U/L,ALT活性从（64±11）U/L降低至（859±7）U/L, AST活性从（395±122）U/L降低至（331±86）U/L（P<0.05 vs.Mod）;Ori可减轻心肌梗死大鼠心肌纤维变性坏死及水肿程度。预防性给予1.0 mg/kg及2.0 mg/kg Ori可升高大鼠血清抗氧化酶水平,2.0 mg/kg Ori可使血清SOD活性从（164±39）U/mL升高至（230±45）U/mL（P<0.05 vs.Mod）,1.0 mg/kg及2.0 mg/kg Ori可使GSH-Px活性从（593±55）U/mL分别升高至（672±41）U/mL及（792±79）U/mL（P<0.01或P< 0.001 vs.Mod）。Ori（1.0 mg/kg,2.0 mg/kg）还可使心肌组织cGMP水平由（0.123±0.025）pmol/mg protein分别升高至（0.433±0.183）pmol/mg protein及（0.784±0.256）pmol/mg protein,与模型组有统计学差异（P<0.05或P<0.001 vs.Mod）。结论1.Pit可诱导大鼠急性心肌缺血性损伤,Ori可预防Pit诱导的急性心肌缺血大鼠心电图改变,对心肌缺血性损伤具有保护作用。2.小剂量ISo可诱导大鼠急性心肌缺血性损伤,Ori可缓解ISo诱导的急性心肌缺血大鼠心电图改变,对心肌缺血性损伤具有保护作用。3.大剂量ISo可诱导大鼠急性心肌梗死,Ori可改善ISo诱导的急性心肌梗死大鼠心电图、血流动力学指标、血清心肌酶漏出率及心肌病理损伤程度,并提高血清抗氧化酶活性,对急性心肌梗死具有保护作用。4.Ori对大鼠急性心肌梗死的保护作用可能与增强抗氧化能力,提高心肌组织cGMP水平和调节NO/cGMP信号通路有关。