论文摘要
背景 缺血性心脏病目前治疗主要是常规的药物治疗、冠脉介入（PCI）及冠脉旁路移植术（CABG）,然而相当一部分患者药物治疗难以见效,也不适于常规血运再通术处理,所以必须寻求其它方法。近年来,随着分子生物学技术的进步,基因治疗促缺血心肌血管新生已成为冠脉血运重建术中具有发展前景的新方向。促血管生长因子研究较多的有VEGF、FGF等,虽然Ⅰ期临床试验结果证明安全有效,但Ⅱ期临床试验结果并不理想,资料显示VEGF可导致血管渗漏、组织水肿等,FGF治疗则与蛋白尿有关。血管生长过程本身受一系列生长因子的调节,单个生长因子治疗并不足以诱导成熟的血管新生。低氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor 1,HIF-1）是细胞对低氧/缺氧作出适应性反应的关键性转录因子,通过对VEGF等多种靶基因的转录调控参与了血管新生、红细胞生成等病理生理过程。HIF-1α是其亚单位,决定HIF-1的活性。然而HIF-1α常氧下容易降解,主要与常氧状态下HIF-1α ODD区Pro564和Pro402发生羟基化有关,突变其中任一位点的单突变型HIF-1α在常氧下都可以得到表达。临床前期研究表明,应用具有组成型表达活性的HIF-1α基因治疗可诱导生理功能完整的血管新生。基因转移载体中质粒载体由于其转染效率低很难在靶细胞得到目的基因高表达,腺病毒载体较其他病毒载体具有制备容易、感染谱广、病毒滴度高、不引起插入突变等优点而成为治疗性血管新生最具临床应用价值的载体之一。因此,我们在业已完成对HIF-1αPro564定点突变及表达分析基础上,拟构建能在哺乳动物细胞得到外源基因高表达的携带HIF-1α及HIF-1α Ala564
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