活体光学成像技术的建立和在肿瘤研究中的应用

活体光学成像技术的建立和在肿瘤研究中的应用

论文摘要

荧光和化学发光的分子影像技术是动物活体内无创性实时跟踪肿瘤生理生化过程和病理发生的崭新技术。但是,目前我国由于没有该技术所需要的系统的标记动物和标记细胞等,使得这一技术在我国没有广泛使用。本课题的主要目的是建立荧光和化学发光的分子影像技术所需要的标记动物,以及常用的标记细胞。本文成功建立了强表达绿色荧光蛋白(GFP)的转基因小鼠,和萤火虫荧光素酶(LUC)转基因小鼠,以及12种荧光标记的肿瘤细胞,为活体光学成像,尤其是在肿瘤方面的应用提供了标记动物和标记细胞。本研究利用绿色荧光小鼠和红色荧光蛋白标记的小鼠黑色素瘤细胞(B16-RFP),建立了双荧光标记的小鼠肿瘤模型,并且用香菇多糖进行干预,利用活体荧光成像系统和荧光显微镜成像的技术在整体和细胞水平上直接观察肿瘤的变化过程,验证了该技术的实用性和直观性。

论文目录

  • 英文缩略词
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 材料与方法
  • 一 材料
  • 1. 质粒和菌株
  • 2. 细胞系
  • 3. 实验动物
  • 4. 主要试剂及试剂盒
  • 5. 主要仪器
  • 6. 所需溶液的配制
  • 二 方法
  • (一) chicken β-actin-GFP的构建
  • (二) chicken β-actin-hluc的构建
  • (三) 转基因操作
  • (四) 转基因阳性鼠的PCR法鉴定
  • (五) 影像分析GFP转基因小鼠和LUC转基因小鼠
  • (六) 细胞培养
  • (七) 真核细胞的转染及筛选
  • (八) 整体荧光成像
  • (九) 细胞水平的成像
  • 实验结果
  • 一 载体构建
  • 二 细胞标记
  • 三 动物标记
  • 四 在肿瘤研究中的应用
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 个人简历
  • 致谢
  • 相关论文文献

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