白茅根牙膏对唾液中变形链球菌和白色念珠菌的作用研究

论文摘要

研究背景和目的白茅根为禾本科植物白茅的根茎。始载于《神农本草经》,原名茅根,以根色白而得名。白茅根味甘性寒,入肺、小肠、胃经,具有凉血止血、清热利尿之功效。白茅根具有多种活性成分,主要包括糖类、五环三萜类化合物、有机酸类等有效成分。白茅根具有广泛的药理作用,包括利尿作用、止血作用、抗菌作用、免疫调节作用、抗炎与镇痛作用、抗肿瘤作用等等。临床常用于治疗吐血淋病、小便不利、急性肾炎、肝炎、水肿和血尿、黄疸、止血及消炎等。白茅根价格便宜,疗效显著,深受历代医家喜爱。白茅根资源广泛,药效稳定可靠,炮制简便,具有很大的开发利用前景。在口腔中牙龈出血多数是由牙龈炎或者牙周炎造成的,而白茅根具有广泛的药理作用,而且是对治疗牙龈出血效果比较明显,因此白茅根在口腔中具有广阔的应用前景。为进一步探讨白茅根对口腔常见致病菌的作用,我们将白茅根的提取物制备成牙膏,并收集具有牙周炎或牙龈炎等具有牙周组织炎症的患者的病例,在使用该牙膏前后口腔中的唾液,提取唾液中具有致病能力的两种微生物——主要的致龋菌变形链球菌和口腔念珠菌病等口腔黏膜感染的主要致病菌白色念珠菌的DNA,通过荧光定量PCR（Taqman探针法）检测这两种微生物的含量在使用牙膏前后的变化情况,探讨该牙膏的相关作用机制及其在口腔护理中的应用前景。方法采用双盲、随机试验设计,以67名有牙周炎症问题的成年自愿者（均为佛山市南海区某工厂的员工）为试验对象,于受试者各自使用2种牙膏（代号分别为A、B）前后1周分别采集其非刺激性唾液,提取样本中变形链球菌及白色念珠菌的DNA。同时提取变形链球菌和白色念珠菌标准菌株的DNA,测定其浓度作为标准品,通过荧光定量PCR Taqman探针法测定其标准曲线及计算每例样本中DNA的拷贝数。最后通过SPSS 13.0统计软件分析变形链球菌和白色念珠菌在使用牙膏前后的含量变化情况。结果1.两组受试者使用牙膏前后唾液中白色念珠菌的比较白色念珠菌标准株标准品的标准曲线线性关系良好（相关系数r大于0.99）。根据标准曲线计算每例样白色念珠菌的拷贝数,结果表明,使用A牙膏前,A组受试者唾液样本中白色念珠菌的基线浓度中位值为4.75×106 copies/mg,使用A牙膏1周后,下降为1.80×106 copies/mg,经配对秩和检验,P=0.008,提示二者差异有统计学意义。使用B牙膏前,B组受试者唾液样本中白色念珠菌的基线浓度中位值为5.15×106 copies/mg,使用B牙膏1周后,上升为7.05×106 copies/mg,经配对秩和检验,P=0.504,提示二者差异无统计学意义。以上结果提示使用A牙膏能有效抑制白色念珠菌的生长。2.两组受试者使用牙膏前后唾液中变形链球菌含量的比较变形链球菌标准株标准品的标准曲线线性关系良好（相关系数r均大于0.99）。根据标准曲线计算每例样本变形链球菌的拷贝数,结果表明,使用A牙膏前,A组受试者唾液样本中变形链球菌的基线浓度中位值为1.53×106 copies/mg,使用A牙膏1周后,下降为5.71×105 copies/mg,经配对秩和检验,P=0.003,提示二者差异有统计学意义。使用B牙膏前,B组受试者唾液样本中变形链球菌的基线浓度中位值为2.75×106 copies/mg,使用B牙膏1周后,下降为9.01×105 copies/mg,经配对秩和检验,P=0.003,提示二者差异有统计学意义。以上结果提示使用牙膏A和B都能显著降低变形链球菌的含量。由于实验组和对照组在使用牙膏后都能显著抑制变形链球菌,因此我们对使用两组使用牙膏前后变形链球菌的变化进行统计分析,采用非参数秩和检验Mann-Whitney Test,统计结果表明差异没有统计学意义（P=0.74）。3.揭盲实验结束后揭盲,A牙膏为含白茅根的牙膏（含6%白茅根提取物）,B牙膏为不含任何药物的空白牙膏。结论1.荧光定量PCR Taqman探针法是一种简便、特异、定量检测口腔唾液中变形链球菌和白色念珠菌含量的方法。2.使用含白茅根的牙膏可显著减少口腔唾液中口腔黏膜感染的主要致病菌——白色念珠菌的含量。3.使用含白茅根的牙膏是否可减少口腔唾液中主要的致龋菌——变形链球菌的含量尚待进一步研究。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 实验一 使用含白茅根牙膏前后口腔白色念珠菌 #8的检出状况研究
• 1. 材料和方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 小结
• 实验二 使用含白茅根牙膏前后变形链球菌的检出状况研究
• 1. 材料和方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 小结
• 参考文献
• 全文小结
• 攻读学位期间成果
• 致谢
• 统计学证明